米诺环素在大鼠脑梗死后尿激酶延迟溶栓中脑保护作用的探讨

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目的通过研究大鼠急性脑梗死尿激酶(Urokinase,UK)延迟溶栓治疗后小胶质细胞增殖和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达及米诺环素(Minocycline,MC)对前两者的影响,探讨UK延迟溶栓对脑组织的损伤作用及MC在延迟溶栓中的神经保护作用。方法140只实验动物随机均分为5组: Sham组、NS组、UK1.5组、UK6组、UK+MC组。自体血栓栓塞法制备SD大鼠局灶性大脑中动脉闭塞模型。术后1.5h和6h分别经静脉予UK,4h予MC。各组缺血24h后,采用TTC染色观察脑组织梗死体积变化;HE染色观察脑组织形态学改变;免疫组化法检测小胶质细胞特异性标志物植物凝集素(Bandeiraea Simplicifolia Isolectin B4,BS-IB4)的表达,分析小胶质细胞的增殖差异;比色法测定脑组织中伊文思蓝(Evan’s blue,EB)含量,分析血脑屏障通透性的变化;Western-blot相对定量法检测MMP-9的表达差异。各处理组实验结果方差齐性采用单因素方差分析,P<0.05提示差异具有统计学意义。结果1.UK1.5组和UK+MC组缺血侧脑组织病理学损伤均较NS及UK6组减轻。2.术后24h,sham组未见脑梗死;UK1.5组和UK+MC组,与NS及UK6组相比,梗死体积均明显缩小;UK6组与NS组相比无差异。3.BS-IB4在各缺血组的表达均增加。其中与NS及UK6组相比,UK1.5组和UK+MC组BS-IB4表达均减少;而UK6组与NS组无差异。4.UK+MC组缺血侧脑组织EB含量较各缺血组均显著降低。5.各缺血组MMP-9表达均较sham组增多;UK6组与NS组无差异,而较UK1.5组增多;UK+MC组较NS及UK6组减少。结论1.UK延迟溶栓增加溶栓治疗并发症的发生风险。2.米诺环素可抑制小胶质细胞增殖及MMP-9的表达,从而可能延长UK治疗时间窗。
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