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a-烯醇化酶(alpha-enolase,enol)又称为非神经烯醇化酶(non-neural,NNE)是烯醇化酶的三个亚型之一,主要位于细胞质,也存在于多种真核细胞的细胞膜及细胞核中[1]。enol在很长一段时间内被认为是一种古老的、功能单一的糖酵解酶,近年来研究证实enol是一种多功能蛋白质,除催化糖酵解反应外,还参与转录、凋亡的调控及细胞分化等过程,在许多生物学和病理生理过程中发挥重要作用,目前研究较多的是enol与恶性肿瘤和自身免疫病的关系。本研究重点探讨血清enol蛋白及其自身抗体在肺癌中的变化及意义。 第一部分 检测肺癌等几种a-烯醇化酶相关疾病患者血清enol蛋白及其自身抗体水平 目的:检测肺癌、其他恶性肿瘤(包括肝癌和乳腺癌)、类风湿性关节炎、慢性肾炎患者血清enol蛋白及其自身抗体水平,分析这两个指标在上述疾病中的表达特点。方法:采用ELISA检测45例肺癌患者(肺癌组)、50例肝癌和乳腺癌患者(其他肿瘤组)、40例类风湿性关节炎患者(类风湿关节炎组)、39例慢性肾炎患者(慢性肾炎组)、40例健康体检者(对照组)血清enol蛋白及其抗体水平,比较各组与对照组两个指标水平的差异。结果:(1)enol蛋白水平:肺癌组、其他肿瘤组明显高于对照组(p<0.001);类风湿关节炎组、慢性肾炎组与对照组之间没有统计学差异(p>0.05)。(2)enol抗体水平:肺癌组、其他肿瘤组明显高于对照组(p<0.001);类风湿关节炎组、慢性肾炎组高于对照组(p<0.05)。结论:在肺癌等恶性肿瘤患者中能同时检测到高水平的血清enol蛋白及其自身抗体;在类风湿性关节炎、慢性肾炎患者中enol抗体水平升高,而enol蛋白不升高,提示血清enol蛋白及其自身抗体可能对肺癌患者具有一定的临床意义,且enol蛋白更具价值,有必要深入研究。 第二部分 分析肺癌患者组织enol和血清enol蛋白及其抗体的表达特点 目的:检测肺癌患者肿瘤组织enol表达和血清enol蛋白及其自身抗体水平,探讨enol及其自身抗体在肺癌中的表达特点及临床意义。方法:(1)采用免疫组化SP染色方法检测72例肺癌患者、60例肺部良性病变患者组织enol表达水平。(2)采用ELISA方法检测82例肺癌患者、69例肺部良性病变患者、70例健康体检者血清enol蛋白及其抗体水平,应用SPSS19.0进行逐步Logistic回归分析并制作ROC曲线,比较两个指标单项及联合检测对肺癌的诊断效能。结果:(1)肺癌组织中enol表达率为50.0%,肺部良性病变组织为10.0%.两者差异具有统计学意义(p=0.000);鳞癌组enol表达率为50.0%、腺癌组表达率为52.6%,其他组为40.0%,三者之间没有统计学差异(p>0.05);Ⅰ、Ⅱ期肺癌阳性率为58.8%,高于Ⅲ、Ⅳ期肺癌28.6%,差异具有统计学意义(x2=5.445,p=0.018);肺癌组织enol表达与患者年龄(p=0.443)、性别(p=0.462)、有无吸烟史(p=0.098)均无关。(2)肺癌组血清enol蛋白、enol抗体水平明显高于良性肺病组和对照组,差异均有统计学意义(p<0.001);腺癌组、鳞癌组和其他组之间,两个指标水平无统计学差异(p>0.05);Ⅰ、Ⅱ期肺癌组enol抗体水平略高于Ⅲ、Ⅳ期肺癌组(p=0.049),而两组间enol蛋白水平无统计学差异(p=0.321);血清enol蛋白及其抗体水平与患者年龄、性别、有无吸烟史无关(p>0.05)。(3)血清enol蛋白、enol抗体及两者联合检测诊断肺癌的AUC分别为0.750、0.736、0.900;灵敏度分别为86.6%、68.3%、89.0%;特异性为69.8%、74.1%、84.2%。结论:肺癌患者肿瘤组织enol表达、血清enol蛋白、enol自身抗体水平明显升高;组织enol表达、血清enol抗体水平与肺癌临床分期相关,与病理分型、患者性别、年龄、有无吸烟史无关;血清enol蛋白与肺癌临床分期、病理分型、患者性别、年龄、有无吸烟史均无关;血清enol蛋白及其自身抗体联合检测具有互补作用,对肺癌的诊断效能优于单项检测,提示这两个指标对肺癌的诊断具有重要的价值。