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目的:明确mi RNA-148b-3p与HOTAIR的相互作用方式,寻找二者直接作用的靶序列,揭示mi RNA-148b-3p介导HOTAIR低表达抑制人脑胶质细胞瘤增殖、侵袭的作用。方法:通过分析Pubmed基因表达文库GEO中的lnc RNA在胶质瘤中的差异表达谱,确定HOTAIR在胶质瘤中是否存在差异性表达,且表达水平与患者生存时间是否相关。根据胶质瘤患者各个差异HOTAIR表达水平和患者生存资料,分析其是否影响预后。然后比较胶质瘤A172细胞系与HA1800正常星形胶质细胞中HOTAIR表达量。通过MTT、流式以及Transwell实验测试体外下调HOTAIR表达量是否影响A172细胞增殖率、迁移率及细胞周期阻滞。转染si HOTAIR的A172并测试mi R-148b-3p的表达水平,转染mi R-148b-3p的A172细胞并测试HOTAIR表达,分析两者的表达得到相关性。构建包含mi R-148b-3p结合位点的HOTAIR片段的pmir GLO双荧光素酶报告基因载体,分析过表达mi R-148b-3p对pmir GLO-HOTAIR-WT报告基因的荧光素酶活性的影响,将mi R-148b-3p结合位点突变后,分析荧光素酶活性作用改变。体外上调mi R-148b-3p量,通过MTT、流式以及Transwell实验检测A172细胞增殖、侵袭能力及细胞周期改变。结果:对GSE4290数据集的分析结果显示,肿瘤组织HOTAIR表达量明显高于相匹配的正常组织(P<0.05)。病理分期III期肿瘤组织中HOTAIR的表达量显著高于病例分期II期,但IV期与III期没有显著区别(P=0.286)。对GSE4217数据集进行分析的结果表明,病理分期IV期肿瘤组织中HOTAIR的表达量显著高于病例分期III期(P<0.05)。分析了全部纳入中国患者的GSE52009数据集,其中病理分期IV期肿瘤组织中HOTAIR的表达量显著高于病例分期III期(P<0.05),该数据集中,II期与III期没有显著区别(P=0.367)。与空白组、阴性对照组相相比,除0h组外,其他时间点si HOTAIR转染组细胞增殖率显著降低,其中72h组差异极显著(P<0.001),结果有统计学意义。转染后随着时间的延长,胶质瘤细胞G0/G1期细胞逐渐增加,S期相对减少。si HOTAIR转染A172细胞48h后,Transwell示,si HOTAIR组穿过小室基底膜的紫色细胞数量明显少于空白组及阴性对照组。si HOTAIR组侵袭能力显著低于空白组及阴性对照组(P<0.001)。Real-time PCR结果显示,胶质瘤细胞A172中HOTAIR表达较正常星形胶质细胞HA1800显著降低(P<0.001)。si HOTAIR后,与空白组和对照组相比,mi R-148b-3p的表达水平随着转染时间增长而显著增高(P<0.001)。向A172细胞中分别转染了mi R-148b-3p mimic以及inhibitor,实时荧光定量PCR检测,与阴性对照组相比,mi R-148b-3p mimic转染后,除24h时间点组外,其他时间点组的HOTAIR表达量显著降低,且具有时间依赖性。与阴性对照组相比,mi R-148b-3p inhibitor转染后,HOTAIR表达量随着转染时间正常而显著增加。胶质瘤A172细胞中,共转染mi R-148b-3p mimics和pmir GLO-WT重组载体时,细胞的萤光素酶活性明显受到抑制(P<0.05)。而共转染mi R-148b-3p mimics和pmir GLO-MUT重组载体的细胞,以及转染有mi R-148b-3p negative control和重组载体的之间细胞的萤光素酶活性没有明显差异。MTT分析法示:与空白组、阴性对照组相相比,除0h组外,其他时间点mi R-148b-3p mimic转染组细胞增殖率显著降低,24h时间点差异显著(P<0.05),48、72h组差异极显著(P<0.001),结果均有统计学意义。mi R-148b-3p mimic转染A172细胞,Guava微流式细胞分析表明,转染后随着时间的延长,胶质瘤细胞G0/G1期细胞逐渐增加,S期相对减少。mi R-148b-3p mimic转染A172细胞48h后,mi R-148b-3p mimic组穿过小室基底膜的紫色细胞数量明显少于空白组及阴性对照组。统计结果同样表明,mi R-148b-3p mimic组侵袭能力显著低于空白组及阴性对照组(P<0.001)。结论:HOTAIR在胶质瘤细胞系及组织中高表达,沉默HOTAIR能够抑制胶质瘤细胞的恶性生物学行为,提示HOTAIR在胶质瘤的发生发展过程中发挥重要作用,HOTAIR是mi R-148b-3p的靶基因之一,mi R-148b-3p能够抑制HOTAIR异常表达诱导的恶性生物学行为。