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由于人类活动导致大气O3浓度不断升高,将对农业生态系统产生重大影响。已有研究表明,高浓度O3可通过寄主植物营养和抗性代谢改变“昆虫-植物-病毒”的相互作用关系,但是其内在机制仍有待阐明。B型和Q型烟粉虱(Bemisiatabaci)是重要的世界性入侵害虫,可介导多种植物病毒的传播。本文以B型和Q型烟粉虱-番茄(Solanum lycopersicum)-番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)三者为对象,在模拟O3浓度升高的野外开项式气室内,以植物激素(脱落酸、乙烯)信号途径突变体番茄为实验材料,深入研究O3浓度升高背景下烟粉虱适合度、传毒能力和TYLCV发生特征及其作用的分子机制,取得了以下研究结果: 1)B、Q两种生物型烟粉虱适合度以及获毒能力对大气O3浓度升高的响应 通过在模拟O3浓度升高的野外开顶式气室内观测B、Q两种生物型烟粉虱适合度以及获毒能力,发现O3浓度升高显著降低B型烟粉虱的种群丰度和产卵数量;相反,显著增加Q型烟粉虱的种群丰度和产卵量。进一步利用刺吸电位图谱技术(EPG)研究了烟粉虱的取食行为,结果表明:O3浓度升高条件下B型烟粉虱首次到达韧皮部时间明显增长,而Q型烟粉虱没有明显差异;B型烟粉虱吞咽韧皮部汁液的时间显著减少,而Q型烟粉虱显著增加。同时,O3浓度升高显著降低了B型烟粉虱获得病毒效率、饱和带毒量;相反,显著增加Q型烟粉虱的获毒效率和饱和带毒量。这些研究清楚表明,O3浓度升高抑制了B型烟粉虱的取食,进而降低了其传毒能力;而高O3浓度则有利于Q型烟粉虱的取食,增加了其传毒能力。 2)O3浓度升高通过脱落酸信号通路降低了B型烟粉虱在番茄上的适合度 进一步利用脱落酸(Abscisic acid,ABA)不合成突变体not植株及其野生型AC植株,深入分析了O3浓度升高下番茄对B型烟粉虱影响的机制。结果表明,O3浓度升高可诱导野生型AC番茄叶片胼胝质的积累,从而降低了烟粉虱种群数量并抑制了烟粉虱的取食;而在ABA突变体not植株上,高浓度的O3不能诱导胼胝质的积累,因此烟粉虱的种群数量和取食均未受到影响。如通过外源喷施ABA后,AC/ABA植株胼胝质含量进一步增加,O3浓度升高对烟粉虱的种群数量及韧皮部取食更加不利;而在AC/ABA植株上继续喷施胼胝质抑制剂2-DGG后,增高的O3则又不能诱导胼胝质的积累,烟粉虱的种群适合度未受影响。这些结果显示,高浓度O3可显著激活ABA信号而加速胼胝质的积累,从而不利于B型烟粉虱的韧皮部取食。 3)O3浓度升高通过乙烯信号通路增加了Q型烟粉虱在番茄上的适合度 O3浓度升高还可影响植物乙烯(ET)信号途径。通过利用ET突变体Nr植株及其野生型AC植株,深入研究了Q型烟粉虱适合度的作用,结果表明,在野生型AC植株上,O3浓度升高可激活植物ET信号途径,促进植物早衰,增加了叶片的必须氨基酸水平,从而有利于Q型烟粉虱种群的发生。而在突变体Nr上,O3升高引起的叶片早衰表现明显轻于野生型番茄AC植株,同时叶片必须氨基酸含量的增加幅度也相对较低。因此,尽管突变体Nr上,O3浓度升高有利于Q型烟粉虱种群的发生,但是其变化幅度明显低于AC野生型。说明O3浓度升高激活植物ET信号导致叶片必需氨基酸含量的增加,有利于Q烟粉虱的韧皮部取食。 4)大气O3浓度升高对番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的影响 通过在番茄上接种TYLCV,观测了大气O3浓度升高对TYLCV的影响。发现O3浓度升高会延迟TYLCV的发病时间,而植物发病率、病情指数以及病毒拷贝数则显著增加。其中,在野生型AC植株上,O3浓度升高增加叶片胼胝质的积累,植物发病时间延迟;但是在ABA突变体not植株上,O3浓度升高不能诱导胼胝质积累,植物发病时间未受到影响。因此,TYLCV发病时间的延迟受到ABA信号诱导的胼胝质积累的调控。除了激素信号外,植物RNA沉默途径在调控植物病毒复制过程中也至关重要。经测定TYLCV相关的RNA沉默信号基因的表达量发现,O3浓度增加显著降低AC和not植株上AGO4基因的表达量,植物病毒拷贝数、发病率以及病情指数增加。这些结果表明,O3浓度增高一方面激活ABA信号提高胼胝质含量不利于TYLCV的运输,另一方面抑制RNA沉默途径的AGO4基因有利于TYLCV的复制。显示,在O3浓度不断增加的背景下,尽管TYLCV的发病时间会被延迟,但却面临着更严重的病毒病爆发而带来的经济损失。 本论文系统研究了大气O3浓度升高背景下,入侵性烟粉虱(B、Q)适合度和获毒能力的响应特征及内在机制,为全球气候变化下开展不同生物型烟粉虱和TYLCV的治理、防控以及预测预报提供科学依据。主要的创新点体现在: 1、明确O3浓度升高对烟粉虱适合度以及获毒能力的影响存在生物型特异性:高O3浓度对B型烟粉虱不利,而Q型烟粉虱有利; 2、揭示植物ABA信号通路在调控B型烟粉虱和TYLCV病毒响应O3浓度升高过程的作用机制; 3、阐明植物ET信号通路在调控Q型烟粉虱响应O3浓度升高过程的分子机理。