真菌免疫调节蛋白LZ-8密码子优化表达及功能初步检测

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:taishengqi_1
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:原核优化表达并纯化LZ-8重组蛋白,对其免疫抑制活性做出检测评估。方法:利用生物信息学方法和工具对LZ-8蛋白和其所属的真菌免疫蛋白家族各成员进行分析和预测,以便对实验进行优化设计。设计并合成12个经过密码子优化的寡核苷酸片段,用重叠延伸PCR的方法将这些寡核苷酸片段连接成为新的LZ-8蛋白cDNA。将该cDNA连接进入pET-28b表达载体形成pET-28b_lz8重组质粒。以大肠杆菌BL21菌株为宿主,诱导表达重组蛋白,并用Ni离子亲和层析纯化重组蛋白。最后通过不同品系小鼠的皮肤移植模型检测重组蛋白的功能。结果:成功构建了能高效表达FIP-128重组蛋白的工程菌株。重组蛋白在宿主菌内表达,纯化后测定产量为70mg/L菌液。不同品系小鼠的皮肤移植模型检测评估表明:重组蛋白一定程度上提高了小鼠移植皮肤的存活率,具有一定的免疫抑制功能。结论:经密码子优化后,重组LZ-8蛋白能在大肠杆菌中具有很高的表达量,并具有一定的免疫调节功能。
其他文献
电梯的安全可靠运行关系到人身和设备安全,对其运行过程的实时监控和故障诊断研究具有重要意义;目前国内外学者对电梯的故障诊断都有不同程度的研究,但仍有各自的局限性;针对电梯
无线电能传输(Wireless Power Transfer,WPT)技术是一种基于电磁耦合原理的非接触式电能传输技术,具有安全、可靠和便捷等优点,在电动汽车、机器人、医疗器械和智能家居等场
随着全球知识经济崛起,市场的竞争日益激烈,以高附加值、低消耗、低污染和高性价比为特点的文化产业引领我国创新及知识驱动的发展。文化企业作为文化产业的主体,由于资源瓶
随着软件产业的迅速发展,软件在国民经济和社会发展等方面的作用日益突出,优良的软件质量管理标准和软件开发方法是促进软件产业良性发展的重要保障,如软件质量标准ISO9001和