尼古丁对MPTP致帕金森病小鼠嗅觉障碍的作用研究

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目的:嗅觉障碍是帕金森病(Parkinson’s disease,PD)中最常见的非运动症状之一。之前的流行病学研究报道不吸烟PD患者的宾夕法尼亚大学气味鉴别试验(the University of Pennsylvania Smell Identification Test,UPSIT)的评分要低于吸烟的 PD患者,而且PD的发生与吸烟之间存在负相关。但吸烟是如何影响PD患者嗅觉障碍的具体机制仍不清楚。因此我们使用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的 PD 模型小鼠来研究尼古丁对嗅觉功能的影响。方法:C57BL/6小鼠接受尼古丁(1.0mg/kg)腹腔注射给药持续3周,在第8天的时候腹腔注射MPTP(14mg/kg),共注射4次,每次间隔2 h,制备PD小鼠模型。腹腔注射等量生理盐水的小鼠作为平行对照。在尼古丁注射后的第21天,小鼠的运动能力通过转棒实验和旷场实验来检测。小鼠嗅觉能力的检测则通过埋藏饼干实验、木块实验和嗅觉记忆实验。中脑多巴胺(dopamine,DA)能神经元的丢失通过免疫印迹和免疫组化的方法检测酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的表达来评估。免疫印迹同样也用于观察嗅球(olfactory bulb,OB)和斜角带水平肢中(the horizontal limb ofthe diagonal band,HDB)胆碱能系统的变化。结果:我们发现尼古丁可以改善MPTP诱导的PD模型小鼠的运动能力,还可以减少MPTP小鼠的中脑DA能神经元的丢失。与生理盐水组的小鼠相比,MPTP小鼠的嗅觉察觉与分辨能力都出现下降,而尼古丁可以缓解这一现象。但是MPTP小鼠的嗅觉记忆没有明显的变化。而且,MPTP小鼠的嗅球中乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)的表达水平是明显下降的,而尼古丁的注射则可以减缓其下降。另外,尼古丁还改善了 HDB中乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)能神经元和DA能神经纤维的丢失。结论:尼古丁可以通过保护嗅球中的胆碱能系统来改善MPTP小鼠的嗅觉障碍。而且,尼古丁提高MPTP小鼠嗅球中的胆碱能系统与减轻中脑DA能神经元的丢失相关。
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