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本研究分别使用细管法和OPS法玻璃化冷冻小鼠桑椹胚和囊胚，并使用含有0.5M蔗糖的DPBS液一步稀释法解冻保存1-6d的胚胎，使用添加10％胎牛血清(FCS)的TCM199培养液培养24h或将解冻后的胚胎移植入受体子宫，观察了胚胎的解冻后体外发育能力和移植后受体妊娠率和产仔率，以此讨论小鼠桑椹胚和囊胚玻璃化冷冻的最佳方法和发育阶段。试验结果表明：1、使用一步法玻璃化冷冻，当胚胎在EFS40中平衡0.5min，解冻后使用TCM199培养24h，桑椹胚的囊胚化率为70.59％，而囊胚则仅有41.94％在解冻后继续发育。胚胎在EFS40中平衡1.0min，桑椹胚和囊胚解冻后体外发育率分别为52.27％，50.00％。使用两步法玻璃化冷冻，胚胎先在EFS20中平衡2.0min，然后在EFS40中平衡0.5min，解冻后桑椹胚经24h培养后囊胚化率为81.13％，极显著高于囊胚的扩张率(48.94％)(P＜0.01)。两步法冷冻在EFS40中平衡1.0min，解冻后桑椹胚的囊胚化率和囊胚的扩张率分别为75.00％，45.00％。2、胚胎移植入受体后，桑椹胚鲜胚和两步法冷冻桑椹胚的妊娠率分别为42.86％和28.57％。两步法冷冻胚胎，胚胎先在EFS20中平衡2.0min，然后在EFS40中平衡1.0min，无论桑椹胚还是囊胚移植后均未获得妊娠受体。两步法冷冻，胚胎先在EFS20中平衡2分钟，然后在EFS40中平衡0.5min，桑椹胚在解冻移植后产仔率(11.11％)显著高于囊胚(4.11％)(P＜0.05)。两步法冷冻桑椹胚移植后妊娠率(28.57％)和产仔率(11.11％)显著高于一步法(14.29％，3.80％)(P＜0.05)。3、一步法处理桑椹胚，胚胎在EFS40中平衡0.5 min，经24h培养后囊胚化率为72.31％，显著高于在EFS40中平衡1.0 min的桑椹胚(47.62％)，与桑椹胚鲜胚(81.54％)相比差异不显著(P＞0.05)。一步法处理囊胚，胚胎在EFS40中平衡0.5min，经24h培养后扩张率为25.00％，极显著低于桑椹胚(47.62％)和鲜胚(81.54％)的扩张率(P＜0.01)。两步法处理桑椹胚，胚胎先在EFS20中平衡2分钟，然后在EFS40中平衡0.5 min，经24h培养后囊胚化率为81.43％，极显著高于囊胚(46.15％)的扩张率(P＜0.01)。4、一步OPS法玻璃化冷冻小鼠桑椹胚获得了96.83％的囊胚化率，与一步细管法(90.16％)相比差异不显著(P＞0.05)。桑椹胚的一步细管法和一步OPS法囊胚化率(90.16％，96.83％)均显著高于囊胚的扩张率(77.36％，56.36％)(P＜0.05，P＜0.01)。两步OPS法玻璃化冷冻小鼠囊胚体外培养24h后扩张率达到71.15％，显著高于两步细管法(P＜0.05)。两步OPS法和两步细管法冷冻小鼠桑椹胚，囊胚化率分别为93.44％和96.72％，两者间无显著差异。5、使用OPS两步细管法冷冻桑椹胚，胚胎在EFS40中平衡0.5min，解冻移植后受体妊娠率(42.86％)和产仔率(12.35％)均显著高于一步法冷冻桑椹胚(2.53％)和在EFS40中平衡1min桑椹胚(3.57％)(P＜0.01)。两步法冷冻，胚胎在EFS40中平衡0.5 min，囊胚解冻移植后受体妊娠率(28.57％)和产仔率(5.48％)显著低于桑椹胚(42.86％，12.53％)(P＜0.05)。