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运用大鼠原代肝细胞的体外培养和Western blotting等技术，探讨了传统中药黄芩及其单体成分黄芩苷、汉黄芩素等对肝细胞中CYP450 3A1的影响，旨在探讨黄芩体外药物代谢的分子机制，为临床用药提供理论依据，以达到合理用药、安全用药的目的。采用胶原酶二步灌流法获取大鼠肝细胞，用不同浓度的黄芩苷、汉黄芩素、黄芩苷-汉黄芩素(1：1)、黄芩粗提物(自制)对肝细胞进行处理，24h、48h后分别裂解细胞内的蛋白质并测定其浓度，用Western blotting法测定肝细胞中CYP450 3A1含量的变化。用不同浓度的乙醇作用于大鼠肝细胞，分别在6h、12h、24h收取上清液和细胞内的蛋白，MTT法测细胞存活率，以上清液中ALT、AST、LDH作为生化指标。从上述试验中选出合适的乙醇浓度制备肝损模型，并用黄芩及其单体成分进行保肝试验，测定ALT、AST、LDH等指标，用Western blotting法测定肝细胞中CYP450 3A1含量的变化。胶原酶两步灌流法获得了大鼠原代肝细胞20ml，密度为1-2×10~7个／ml，成活率95％左右。黄芩苷、汉黄芩素、黄芩粗提物分别在2、0.05、50μg/ml时，黄芩苷-汉黄芩素共同作用24h、48h时，蛋白保持在较高水平；随着黄芩苷、汉黄芩素、黄芩苷-汉黄芩素浓度的增加，各蛋白样品中CYP450 3A1的含量呈明显逐渐减少的趋势，黄芩粗提物也呈减少趋势但不如单体成分明显。50mmol／L乙醇作用12h，肝细胞ALT、AST、LDH值与阴性对照相比差异均显著；乙醇作用肝细胞6h、12h、24h，对CYP4503A1均无明显影响。黄芩苷与乙醇共同作用肝细胞，肝细胞存活率、ALT、AST、LDH与阴性对照相比均呈显著差异的状态；汉黄芩素与乙醇共同作用肝细胞，在浓度为1.0μg／ml时，ALT、AST、LDH与阴性对照比差异均显著，但肝细胞存活率下降明显；黄芩苷-汉黄芩素与乙醇共同作用肝细胞，ALT、AST、LDH与阴性对照比差异均显著，但肝细胞存活率下降明显；黄芩粗提物与乙醇共同作用肝细胞，AST与阴性对照相比差异显著，在10μg／ml时，ALT、AST、LDH与阴性对照比均差异显著，肝细胞存活率下降不明显。黄芩苷、汉黄芩素、黄芩粗提物均具有保护肝细胞的作用，而黄芩苷的保肝作用尤为明显，黄芩苷体外作用的最佳浓度为2μg／ml，汉黄芩素最佳浓度为0.05μg／ml，但毒性很大，黄芩粗提物最佳浓度为50μg／ml，黄芩苷-汉黄芩素合用扩大了安全浓度使用范围。黄芩苷、汉黄芩素对大鼠原代肝细胞中CYP450 3A1具有明显的抑制作用；黄芩粗提物对CYP450 3A1也有抑制作用，但不如单体成分明显。乙醇对大鼠原代肝细胞具有明显的损伤作用，50mmol／L最适合做肝损模型。乙醇对大鼠原代肝细胞中CYP450 3A1无明显的抑制或诱导作用，既乙醇不依赖于CYP450 3A1来代谢。黄芩苷、黄芩粗提物对乙醇造成的大鼠肝细胞损伤均具有显著的保护作用，但他们的保护机制不是通过抑制CYP450 3A1的表达来完成。汉黄芩素保肝作用不是很明显。