目的：检测重组腺病毒IκBαM（AdIκBαM）在肝癌细胞HepG₂中的表达及TNF-α诱导下IκBαM变化情况，并观察此超级抑制物对NF-κB活性的抑制作用，为IκBαM在肝癌基因治疗中的应用提供理论基础。 方法： 1．利用293细胞包装并批量制备体外实验所需重组腺病毒。 2．利用GFP及有限稀释法测定病毒滴度和感染靶细胞的效率。 3．采用Western blotting法检测293细胞和HepG2中重组腺病毒介导的IκBαM的表达及TNF-α诱导下IκBαM变化情况。 4．EMSA实验观察AdIκBαM感染前后经TNF-α处理的HepG2细胞核中NF-κB活性水平的变化。 结果： 1．扩增AdIκBαM的滴度：2×10⁸pfu/L,感染靶细胞HepG₂的MOI为20。 2．AdIκBαM在HepG2中能稳定高效表达且不因TNF-α的诱导而降解，未感染细胞的IκBα及转入的AdIκBα对照则随诱导时间延长而呈现先逐渐降低后升高的趋势。3.EMSA显示:感染AdIκBαM的细胞在处理前后均无NF-κB活化迹 象，而未感染及感染AdIκBα的细胞经TNF-α诱导后则有NF-κB过 度活化情况。 结论:AdiKBaM能高效扩增并有效感染靶细胞HePG:，在HePGZ细胞中呈现稳定高水平表达，且不会被TNF一a诱导而降解，能稳定有效的抑制HePG:细胞中NF一沼的过度活化，_上述结果初步表明，通过IKBaM超级抑制物抑制NF一KB的活性，再辅以常规的抗肿瘤治疗，有望成为一种十分有效的肿瘤基因治疗方法。I沼aM超级抑制物作为肝癌基因治疗的一种新的辅助手段，理论上是可行的。