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食管癌是目前严重危害人类健康的常见恶性肿瘤之一。在我国沿太行山区特别是河南省的林州市是食管癌的高发地区,关于食管癌的癌变机制,尽管许多学者已经进行了大量开创性研究,但仍不很清楚。研究表明,机体细胞数量的恒定取决于细胞增殖和细胞凋亡之间的动态平衡,肿瘤的发生发展是这种平衡发生破坏的结果。本研究利用免疫组织化学染色(s-p法)和细胞凋亡原位检测技术(TUNEL染色),采取较大样本系统地对比研究了食管鳞癌发生发展中增殖(p27、cyclinD1、p53)和凋亡(p53、bcl-2)相关基因蛋白的变化规律和细胞凋亡的同步原位检测。 结果如下:1、cyclinD1、p27、p53和bcl-2表达与食管鳞癌的发生发展 免疫组织化学结果表明:cyclinD1、p53和bcl-2在非典型增生和浸润癌中的表达显著高于正常粘膜上皮(p<0.0 1),p27在非典型增生和浸润癌中的表达显著低于正常粘膜上皮(p<0.01),在食管鳞癌的发生发展过程中p27的表达与cyclinD1的表达呈显著负相关(p<0.01),说明cyclinD1、p27、p53和bcl-2的改变可能是食管鳞癌的发生发展过程中早期分子事件,可作为食管鳞癌早期诊断的分子指标。2、cyclinD1、p27、p53和bcl-2表达与食管鳞癌生物学行为的关系 免疫组织化学结果表明:cyclinD1、p27、p53和bcl-2表达与食管鳞癌的淋巴结转移密切相关(p<0.05),cyclinD1和p53还与食管鳞癌浸润深度密切相关(p<0.01);p27和bcl-2与食管鳞癌的浸润深度虽无显著性差异,但也显示出明显的相关关系(x,分别为3.80和2.50);浸润癌的p53基因表达在大于50岁病例组和小于50岁的病例组有显著性差异(p<0.05),说明cyclinD,、P27、P53和bcl一2表达与食管鳞癌生物学行为密切相关,可作为判断食管鳞癌预后的分子指标。3、食管鳞癌发生发展过程中凋亡的变化TUNEL染色结果显示:凋亡指数(Apoptotie Index,Al)在非典型增生和浸润癌中显著增高(p<0.05或p<0.01),浸润癌中AI大于非典型增生(p<0.05),说明细胞凋亡在食管鳞癌发生发展过程中有一定作用。可能因为肿瘤细胞发生凋亡是受高增殖潜能的克隆亚群诱导以使后者能获更好的增殖因素,以利于肿瘤快速增长或实体瘤缺血、缺氧等因素影响。4、食管鳞癌发生发展过程中凋亡指数与p53和bcl一2表达的关系TuNE七染色结果显示:p53阳性组凋亡指数低于p53阴性组(p<0.05),bcl一2阳性组凋亡指数低于bcl一2阴性组(p<0.05),说明食管鳞癌发生发展过程中凋亡的改变与bcl一2的过表达和mtp53蛋白累积有关。 以上研究结果tJ]步证明:eyelinDI、p27、p53和bel一2等基因的表达异常可能是食管鳞癌发生的早期分子事件,与癌浸润深度及淋巴结转移等恶性生物学行为密切相关,并可能与病人预后有关,食管癌的发生发展是增殖与凋亡平衡发生破坏的结果。因此应用免疫组织化学方法联合检测的上述指标及TUNEL方法同步原位检测的细胞凋亡可作为食管鳞癌早期诊断和判断预后等的重要分子指标。