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第一部分FAM172A在甲状腺乳头状癌组织中的表达目的研究FAM172A在甲状腺乳头状癌组织中的表达。方法1)运用免疫组化方法观察FAM172A在甲状腺腺瘤旁正常组织、甲状腺腺瘤及甲状腺乳头状癌组织中的表达情况。2)运用Western blot在蛋白水平观察FAM172A在甲状腺腺瘤旁正常组织,甲状腺腺瘤及甲状腺乳头状癌组织中的表达情况。结果免疫组化及Western blot技术研究发现FAM172A在甲状腺乳头状癌组织中的表达明显高于正常甲状腺和甲状腺腺瘤组织,而且FAM172A在同一患者的甲状腺乳头状癌组织中的表达也明显高于其癌旁组织。结论FAM172A在甲状腺乳头状癌组织中高表达。第二部分FAM172A通过p38 MAPK信号通路促进甲状腺乳头状癌细胞增殖目的研究新蛋白FAMl72A对人甲状腺乳头状癌细胞IHH-4增殖的影响及其机制。方法1)以前期研究工作中所构建的PDC315-FAMl72A质粒用脂质体2000转染IHH-4细胞,同时用PDC315质粒作为对照转染IHH-4细胞。2)用MTT法和细胞生长曲线法观察过表达FAMl72A基因对IHH-4细胞增殖的影响。3)应用Western blot技术对几个较常见的参与细胞增殖的通路包括PI3K、AMPK、p38MAPK信号通路进行筛选,对筛选出的信号通路进一步验证研究。结果1)与转染PDC315质粒的IHH-4细胞相比,MTT法显示PDC315-FAMl72A质粒转染使细胞增殖增加约18%(24小时)。细胞生长曲线法显示PDC315-FAM172A转染组(24、48、72、96小时)较对照组细胞生长速度更快。2)过表达FAM172A可以激活IHH-4细胞内p38 MAPK信号通路。3)FAM172A激活p38 MAPK信号通路可被p38 MAPK抑制剂SB202190阻断,同时FAM172A对IHH-4细胞的增殖作用也可被SB202190明显抑制。结论1)FAMl72A蛋白促进IHH-4细胞增殖,提示FAMl72A蛋白的生理功能之一是参与细胞生长的调控。2)FAM172A蛋白可能通过激活p38 MAPK信号通路参与甲状腺乳头状癌细胞增殖调控。第三部分FAM172A对甲状腺乳头状癌裸鼠成瘤的影响目的1)建立具有摄锝功能甲状腺乳头状癌皮下移植瘤裸鼠模型,为研究甲状腺乳头状癌的发病机制提供工具。2)初步研究FAM172A对甲状腺乳头状癌裸鼠成瘤的影响。方法1)取人甲状腺乳头状癌细胞系IHH-4,以1×107细胞数制成200ul细胞悬液接种于9只裸鼠(5周龄雌性裸鼠,品系BALB/c-nu/nu)皮下,观察成瘤时间。并用PET-CT观察肿瘤大小及形态,用放射性核素发射式计算机断层(emission computed tomography,ECT)观察移植瘤的摄锝功能。2)PDC315、PDC315-FAMl72A质粒转染IHH-4细胞后,接种于6只裸鼠皮下,成瘤后观察肿瘤的大小、重量及生长方式。ECT观察裸鼠移植瘤大小及摄锝功能,Western blot法研究FAM172A在肿瘤中的表达情况。结果1)裸鼠皮下成瘤率为100.0%(9/9),细胞接种后1周裸鼠皮下可以形成肉眼可见的肿瘤,4周时PET-CT观察肿瘤大小,ECT显示腹腔注射放射性99m锝后15分钟移植瘤可以显像。2)与对照组相比,过表达FAM172A的IHH-4细胞注射后的裸鼠成瘤更大、更重,而且肿瘤呈浸润性生长,同时裸鼠本身的体重也明显减轻。结论1)应用人甲状腺乳头状癌细胞系IHH-4成功建立甲状腺乳头状癌皮下移植瘤裸鼠模型,移植瘤具有良好的摄锝功能,为甲状腺乳头状癌发病机制的研究提供了良好的动物模型。2)FAM172A可促进裸鼠肿瘤浸润性生长,动物水平进一步提示FAM172A参与甲状腺乳头状癌的发病过程。