【摘 要】
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该研究对一个经Coγ射线诱变获得的具有类似表型的水稻矮化突变体dwarf69-6进行了遗传学分析,利用分子标记对其突变座位dwarf69进行了遗传图谱定位,并应用抑制缩减杂交技术对
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该研究对一个经<60>Coγ射线诱变获得的具有类似表型的水稻矮化突变体dwarf69-6进行了遗传学分析,利用分子标记对其突变座位dwarf69进行了遗传图谱定位,并应用抑制缩减杂交技术对其与原种特光矮2号(Teguangai2,简称TGA-2,下同)间生长早期差异表达的基因进行了分析,为分离该突变基因及分析其功能奠定了基础.该研究获得的主要结果如下:1 以dwarf69-6为母本,TGA-2为父本进行杂交,获得F<,2>代1172个单株,表型观察鉴定出291个与dwarf69-6表型相近的植株,分离比符合3:1,表明该矮化突变性状符合受一对隐性基因控制的遗传模式.2 以dwarf69-6和水稻广亲和品种02428为亲本杂交,获得的F<,2>代约2300个单株,表型观察鉴定出558个与dwarf69-6表型相近的植株,分离比符合3:1.其中558个矮株选取作为遗传作图群体,用于共分离分析.3 通过对覆盖水稻全基因组的400多个简单正向重复序列(SimpleSequence Repeats,SSR)标记的筛选,鉴定出4个与dwarf69座位连锁的SSR多态性标记,用作图群体对dwarf69座位进行了初步的定位.4 在RM5955、RM7365两侧设计了25个缺失多态标记(deletionpolymorphic marker,DPM),从中筛选出13个与dwarf69座位连锁的缺失多态标记,用作图群体对dwarf69座位进行了精细定位.5 对dwarf69-6和TGA-2发芽后3、4、5天的幼芽进行cDNA抑制缩减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)分析,分别以dwarf69-6和TGA-2 cDNA为tester,构建了正向、反向两个缩减文库,共包含2112个克隆.对两个文库进行Southern杂交筛选,获得在dwarf69-6和TGA-2中表达水平可能存在差异的33个阳性克隆.6对33个阳性克隆的插入片段进行Northern杂交分析,获得了9个在dwarf69-6和TGA-2生长早期差异表达的cDNA片段.对这9个cDNA片段的序列分析表明,其中4个与核糖体中蛋白质合成有关,3个与光合作用有关,1个与叶绿素合成有关,还有1个在数据库中未发现与其序列相似的已知功能的基因或蛋白.
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