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本研究通过检测AQP-1、3、8、9 mRNA和AQP1、AQP9蛋白在人胎膜各部分的表达,并比较其在羊水正常、特发性羊水过多、特发性羊水过少三组中的差别,探讨水通道蛋白在人胎膜中的表达规律和分布特征及其与羊水量异常之间的关系,并通过体外刺激实验研究雌孕激素对人羊膜上皮WISH细胞(Wistar Institute SuSail Havflick cell)AQP-1、3、8、9表达的影响,探讨雌、孕激素对人羊膜AQPs是否存在调节作用。
第一章水通道蛋白在正常人足月妊娠胎膜中的表达
1.目的:确定水通道蛋白家族成员AQF-1、3、8、9在人正常足月妊娠羊膜、绒毛膜上的表达及分布规律。
2.方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测22例选择性剖宫产的足月、单胎、正常孕妇的胎膜(包括绒毛膜板和反折部羊膜、绒毛膜)中AQP-1、3、8、9mRNA的表达,免疫组织化学图像分析检测AQP1、AQP9蛋白的分布及表达量。
3.小结:
3.1 正常人足月妊娠胎膜上有AQP-1、3、8、9 mRNA的表达,其分布与羊水膜内吸收的主要部位一致。
3.2正常情况下人胎膜上AQP-1、3、8、9 mRNA表达水平在各亚型之间以及羊膜、绒毛膜之间无显著差异。
3.3 AQP1主要表达在羊膜立方上皮细胞和绒毛膜的毛细血管内皮细胞;AQP9主要表达在羊膜上皮细胞、绒毛膜细胞滋养细胞、绒毛合体滋养细胞和细胞滋养细胞。
第二章水通道蛋白在特发性羊水异常胎膜中的表达
1.目的:探讨特发性羊水异常胎膜中AQP-1、3、8、9表达的变化,了解AQPs的表达是否与羊水异常有关。
2.小结:
2.1羊水过少妊娠的羊膜中AQP-1、3、8、9 mRNA和AQP1、AQP9蛋白表达下调,羊水过多妊娠的绒毛膜中AQP-1、8、9 mRNA和AQP1、AQP9蛋白上调,提示羊水异常时胎膜AQP-1、3、8、9的表达发生了变化。
2.2胎膜AQPs表达的变化与羊水量和成分异常可能有关,但是否存在因果关系仍有待进一步研究。
第三章雌孕激素对人羊膜上皮WISH细胞AQPs表达影响的初步探讨
1.目的:初步探讨雌、孕激素对体外培养的人羊膜上皮WISH细胞AQP-1、3、8、9表达的影响。
2.小结:
2.1 WISH细胞可以作为体外研究羊膜上皮细胞AQPs调控机制的细胞模型。
2.2雌、孕激素可能对体外培养的人羊膜上皮WISH细胞AQP1、AQP9的表达有一定的影响,但其体内效应和机制尚不明确。雌、孕激素对AQP3、AQP8 mRNA的表达未见明确的影响。
全文结论:
1.正常人足月妊娠胎膜上有AQFL1、3、8、9 mRNA的表达,其分布与羊水膜内吸收的主要部位一致。
2.AQP1主要表达在羊膜上皮细胞和绒毛膜的毛细血管内皮细胞;AQP9主要表达在羊膜上皮细胞、绒毛膜细胞滋养细胞、绒毛合体滋养细胞和细胞滋养细胞。
3.羊水异常妊娠的胎膜中AQP-1、3、8、9 mRNA和AQP1、AQP9蛋白表达发生了变化,提示AQPs可能与羊水量和成分异常有关,但是否存在因果关系有待进一步研究。
4.WISH细胞可以作为体外研究羊膜上皮细胞AQPs调控机制的细胞模型。
5.雌孕激素可能影响体外培养的人羊膜上皮WISH细胞AQP1、AQP9的表达,但其体内效应和机制尚未明确。雌孕激素对人羊膜上皮WISH细胞AQP3、AQP8 mRNA的表达未见明确的影响。