Duchenne肌营养不良是一种X性连锁遗传疾病，目前无特效治疗。因此，本文为了利用各种示踪剂标记骨髓基质干细胞移植治疗肌营养不良模型的的实验研究，判断移植骨髓基质干细胞的治疗效果，进行了研究讨论。首先，我们采用低糖L-DMEM培养基培养C57/BL/6的股骨骨髓细胞，经过差速贴壁法纯化、扩增、传代观察骨髓基质干细胞的生长能力；其次研究3H对骨髓基质干细胞的毒性影响，绘制细胞在不同放射性浓度的核素中的生长曲线，并用流式细胞仪观察不同放射性浓度中细胞的周期分布，凋亡情况，测定不同浓度的核素中的SOD及MDA，了解核素剂量与凋亡的相关性及其简单机制。第三，观察了不同核素浓度、不同细胞的代数、不同接种浓度的细胞的掺入量。应用细胞放射自显影及激光共聚焦手段比较了3H-TdR与BrdU对骨髓基质干细胞的标记率。第四，了解骨髓基质干细胞在体内如何动态分布，了解了干细胞的分布情况。第五，利用免疫组化联合放射自显影的方法及免疫双标记后用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察移植骨髓基质干细胞有否表达dystrophin蛋白。根据研究结果可以得出结论：差速贴壁法能够很好纯化骨髓基质干细胞，其增殖能力从P13开始减低；高浓度的3H-TdR(4uCi/2ml)影响骨髓基质干细胞的分裂增殖能力，其主要机制为阻滞干细胞在S期及G2-M期，引起细胞不同程度的凋亡，产生氧自由基，使细胞内的SOD下降及MDA升高，毒害干细胞；将P4细胞以5×104/ml浓度接种，加入核素浓度为1uCi/2ml时掺入率最高；3H-TdR、BrdU的标记率都在96％以上，适合示踪。骨髓基质干细胞移植后随时间的增加肌肉分布增多，并能表达dystrophin蛋白，用放射自显影联合免疫组化技术及BrdU/dystrophin免疫双染激光扫描共聚焦技术为移植干细胞的治疗作用提供了直接证据，两种技术各有优点，应合理选用。