【摘 要】
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藏酋猴容易驯养繁殖,生理特点与人类较接近。因此,在多种科学研究领域的研究工作中可作为一种比较理想的实验动物。此外,藏酋猴在组织结构、生理和代谢功能等方面同人类相似,最易解决人类相似的疾病以及解决疾病的发病机制。作为人类疾病研究的理想实验动物,藏酋猴具有其它实验动物不可替代的作用。川金丝猴是金丝猴属中最美的物种,具有极高的观赏价值。并且金丝猴属在系统发育上处于旧大陆猴与猿之间的特殊分类地位。故金丝猴
【基金项目】
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国家自然科学;四川省教育厅重点项目;;
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藏酋猴容易驯养繁殖,生理特点与人类较接近。因此,在多种科学研究领域的研究工作中可作为一种比较理想的实验动物。此外,藏酋猴在组织结构、生理和代谢功能等方面同人类相似,最易解决人类相似的疾病以及解决疾病的发病机制。作为人类疾病研究的理想实验动物,藏酋猴具有其它实验动物不可替代的作用。川金丝猴是金丝猴属中最美的物种,具有极高的观赏价值。并且金丝猴属在系统发育上处于旧大陆猴与猿之间的特殊分类地位。故金丝猴研究对于人们认识和了解人类自身的进化历程有着特别重要的意义,因而具有极高的学术研究价值。 TLR是一个与免疫相关的的基因家族,由于能够特异性的识别病院相关分子模式,经过一系列信号转导途径激活天然免疫和适应性免疫而在免疫相关疾病的防治方面有着重要作用,一直备受各研究学者的关注。通过研究TLR基因家族在藏酋猴、川金丝猴进化过程中的选择压力情况能够为保护这两个国家级动物奠定一定的理论基础。 本研究以四川地区的藏酋猴和川金丝猴为研究对象,测定了这两个物种TLR基因家族10个成员序列: 1)通过PCR扩增和克隆测序等技术首次获得了这两个物种TLR基因家族所有成员完全的蛋白质编码区序列。蛋白质结构预测显示TLR为Ⅰ型跨膜蛋白,有着典型的胞外、胞内和跨膜区,与先前报道的其它物种TLR蛋白的结构大体一致。胞外区富含亮氨酸重复序列,能特异性识别病院相关分子模式的保守结构,胞内区存在高度保守的Toll-白细胞介素-1受体同源结构——TIR,能与适配蛋白MyD88的TIR域相互作用,负责下游的信号转导; 2)相似性分析显示藏酋猴和川金丝猴TLR基因与猕猴的均有着高度的相似性。其相似性均在97%以上,且在与其他物种的比较中也显示出较高的相似性(70%~98%),说明TLR基因在物种间的进化中具有高度的保守性。 3)系统发育树显示,从物种角度看,同为猕猴属的藏酋猴、猕猴和食蟹猴聚为一支,然后和同为旧大陆猴的川金丝猴聚为一支,人和黑猩猩、大猩猩聚为另一支,亲缘关系较远的狨猴单独聚为一支;从基因角度来看,整个TLR基因家族分为6个大的支系,其中,TLR1、TLR6和TLR10聚为一支,TLR2、TLR3、TLM、TLR5各自单独成为一支;TLR7、TLR8和TLR9聚为一支; 4)通过PAMAL软件推导计算猕猴属祖先序列到猕猴、食蟹猴和藏酋猴以及旧大陆猴祖先序列到猕猴属祖先和川金丝猴的dN/dS (ω)值发现,猕猴的TLR4和TLR9基因,食蟹猴的TLR5和藏酋猴的TLR8都受到比较强烈的正向选择压力,但是通过单尾Z检验发现,各正向选择并不显著,只能说有正向选择趋势。当TLR基因被分成非TIR区和TIR区分别计算它们到对应的祖先序列的ω值时发现,非TLR区受到的纯净化选择压力比TIR区弱。猕猴属TLR1、TLR3、TLR4、TLR6、TLR7基因进化速率比川金丝猴要快。且只有猕猴TLR4的非TIR区是显著受到正向选择压力。
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