在哺乳动物体内,精子发生分别由3个阶段组成:首先精原细胞（Spermatogonium）通过有丝分裂进行数量上的增殖,并且一部分精原细胞开始分化产生初级精母细胞（Primary Spermatocyte）;随后二倍体的初级精母细胞通过两次减数分裂产生单倍体的圆形精子细胞（Round Spermatocyte）;最终,圆形精子细胞在经历线粒体鞘的形成、精子鞭毛的发生、精细胞细胞核浓缩、圆形精子脱细胞质等精子细胞变形的过程（Spermiogenesis）形成可以游动的成熟精子（Spermatid）。据统计,约有2000多种基因与精子发生有关。常染色体连锁基因突变主要涉及中枢性性腺功能低下以及精子结构与功能的异常,而性染色体基因的异常会导致更严重的生精障碍。现如今,全球约有7%的男性患有不育症,不育男性常伴随着睾丸组织形态学,精液参数的异常。男性不育由多种因素导致,患者所携带的精子形成相关基因的遗传信息异常是男性不育的一种原因。关注男性不育的遗传机制可以让我们对男性不育患者早发现,早诊断,早治疗,从而更好地服务于男性患者。精子发生的过程中会产生许多生殖细胞特异的转录本,这些转录本来源于许多睾丸优势表达或睾丸特异表达基因。它们的表达是性成熟前发育阶段或性成熟后生精阶段特异性的。部分睾丸特异表达基因对于睾丸内精子发生有着不可或缺的作用。但是还有很多睾丸特异表达基因功能未知。通过基因编辑技术在模式动物中进行一个基因或多个基因的敲除,来研究这些睾丸特异表达的基因在精子发生过程中的作用。先前的一些研究表明,一些基因参与精子鞭毛的形成。精子鞭毛超微结构是“9+2”微管结构:精子鞭毛的轴丝外围是9对二联微管,该二联微管由一个完整的微管和一个不完整的微管构成,这9对二联微管围绕着中央的一对由两个完整微管构成的中央微管。轴丝的形成是精子鞭毛行使功能的基础,用于组装鞭毛的蛋白（如SEPTIN,TEKTIN,AKAP,DRC等）经鞭毛内部重要的运载体——鞭毛内转运蛋白（Intra Flagellar Transport,IFT）在细胞基部和鞭毛双向流动。IFT有多个亚基,这些亚基的缺失会导致严重的鞭毛形成障碍。而精子鞭毛蛋白组分（如Tcte1）的缺失有时不会导致精子尾部形态的异常但是精子的运动能力往往受损。Tex33（Testis expressed 33）是最近发现的睾丸特异性基因,在脊椎动物中是进化保守的。对C57BL/6小鼠进行生精小管进行Tex33转录的m RNA进行原位杂交定位,发现在8w雄性C57BL/6小鼠的圆形精子细胞质中发现Tex33的表达。但是,Tex33的体内功能仍然未知。在这项研究中,我们通过CRISPR/Cas9基因编辑技术在Tex33第二个外显子上构建-62bp的移码突变C57BL/6小鼠。8w的Tex33基因敲除纯合子C57BL/6雄性小鼠可育。在Tex33敲除后的8w C57BL/6纯合子突变雄性小鼠中,睾丸/体重比,睾丸/附睾组织学与对照组（野生型）相比无异常。通过电脑辅助精子分析平台检测,8w雄性Tex33^-/-C57BL/6小鼠精子计数和精子活力等方面未发现明显的差异。TUNEL分析还表明,8w Tex33基因敲除雄性C57BL/6小鼠的生殖细胞凋亡率没有改变。这些结果显示,8w小鼠精子发生过程中,Tex33并非必须基因。我们发现Tex33具有NIRH和SYT两个进化上保守的氨基酸序列模体。我们推测Tex33的功能可能类似于同样具有NIRH和SYT氨基酸序列模体的蛋白质Cplane1,在Tex33敲除后,Cplane1可能发生代偿作用。