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目的研究虎杖中有效成分的最佳提取方法以及大孔吸附树脂纯化虎杖有效部位的工艺条件。优化虎杖浓缩片的制备工艺并测定其中有效成分的含量。观察虎杖浓缩片对四氯化碳(CCl4)致小鼠肝损伤的影响以及由环磷酰胺引起的小鼠白细胞减少的保护作用。方法1.以白藜芦醇苷、白藜芦醇、大黄素、大黄素甲醚和总蒽醌为指标,分别以HPLC和差示分光光度法测定,采用正交试验方法确定提取虎杖中二苯乙烯类和蒽醌类有效成分的最佳工艺。2.以白藜芦醇苷、白藜芦醇、大黄素、大黄素甲醚和总蒽醌的吸附量和解吸率为评价指标,筛选树脂,并优化吸附和洗脱条件。3.以崩解时限、吸湿性、外观作为评价指标对处方工艺进行筛选,制备虎杖浓缩片,并采用HPLC和差示分光光度法测定有效成分的含量。4.虎杖浓缩片分成3个剂量组(给药量折合成生药2.50 g/kg、1.25 g/kg、0.25 g/kg)对小鼠ig给药连续7 d,实验d 6用CCl4造成急性肝损伤模型,d 7测定各组小鼠血清中ALT和AST的水平以及观察肝脏的组织病理学改变。5.通过对小鼠灌胃给药,腹腔注射环磷酰胺,检测血中白细胞总数,探讨虎杖浓缩片对环磷酰胺引起的小鼠白细胞减少的保护作用。结果1.虎杖有效成分的最佳提取工艺为:以5倍量70%乙醇在90℃加热回流3次,每次2 h。提取温度和提取时间对有效成分的综合提取有显著影响。2. D101树脂对虎杖各有效成分具有较好的吸附分离性能,适于纯化虎杖有效部位。最佳工艺条件为:虎杖样品溶液1 BV,吸附流速2.4 BV/h,上样后静置30 min,先用2 BV水洗涤,再用20%,50%,70%,95%乙醇各2, 5, 2, 5 BV进行梯度洗脱,流速2 BV/h,合并50%和95%乙醇洗脱液,即为纯化的总有效部位。3.虎杖浓缩片(总有效部位的制剂)的最佳处方组成为:每片含主药(总有效部位) 0.195 g、乳糖0.08 g、微晶纤维素0.10 g、羧甲基纤维素钠0.02 g、硬脂酸镁0.002 g。所制片剂硬度较好,外观光洁。白藜芦醇苷、白藜芦醇、大黄素、大黄素甲醚和总蒽醌等有效成分的含量测定结果符合规定。4.虎杖浓缩片能显著降低CCl4引起的肝损伤小鼠的ALT(P<0.01)和AST(P<0.01),减轻肝组织变性、坏死程度,缓解肝脏的组织病理改变。5.虎杖浓缩片能够对抗环磷酰胺导致的白细胞降低,明显升高小鼠的白细胞总数水平(P<0.01)。结论本研究首次采用多种有效成分作为综合指标系统探讨了虎杖的提取、有效部位的制备及其片剂的研制,并对所制备的虎杖浓缩片的药效学进行了观察。经优化的提取方法不仅能够充分提取虎杖中的各种有效成分,而且经济可靠,对各类虎杖制剂的开发具有指导意义。采用D101树脂吸附纯化制备的虎杖总有效部位其总有效成分纯度为36.87%,纯度得到了较大提高,工艺路线可行。优化处方制备的虎杖浓缩片符合制剂要求,并且能明显减轻由CCl4引起的小鼠肝损伤以及升高由环磷酰胺引起的白细胞降低,药效学指标按生药量计与市售虎杖粗提物制剂基本相当。基于上述结论,认为虎杖浓缩片的制备是成功的,对于研制剂量小,便于服用和携带的现代中药制剂是一次有益的尝试。