腹腔灌洗液中代谢产物与胃癌腹膜转移关系的研究

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目的:应用液相色谱质谱联用技术(LC-MC)研究胃癌腹腔灌洗液样本的代谢产物差异。寻找诊断胃癌腹膜转移的重要潜在生物标记物。方法:选择吉林大学第一医院胃肠外科2018年8月至2018年12月期间的胃癌患者共62例,收集临床资料及腹腔冲洗液(200ml),送检胃癌腹腔灌洗液脱落细胞学检查阳性率为14.52%(9/62)。应用qRT-PCR技术对62例样本的腹腔灌洗液CEA mRNA水平进行检测,经过Comparative Delta-delta Ct法进行分析,根据以上资料对62例胃癌样本进行分组如下:(1)浆膜受侵犯组(T4组)记为A组24例,和浆膜未受侵犯组(非T4组),记为B组38例。(2)腹膜转移阳性组,记为C组13例,和早期胃癌组(T1组),记为D组9例。(3)CEA阳性组,记为E组25例,和CEA阴性组,记为F组37例。应用液相色谱质谱联用技术(LC-MC)检测62例病例确诊为胃癌的患者的腹腔灌洗液的代谢组,根据三种分组,分别比较两组的总离子流图和主成分分析,通过T检验、判别分析、聚类分析、ROC曲线、逻辑回归分析等方法,筛选出区分能力强的差异性代谢产物。结果:A组和B组筛选出的8种差异代谢物分别为:亚硫酸盐、TG(54:2)、3-磷酸甘油醛、α-氨基丁酸、alpha-CEHC、十二醇、谷氨酰丙氨酸、3-甲基丙酸。C组和D组3种差异性代谢产物分别为:亚硫酸盐、CL(63:4)、PE-NMe(40:5)。E组和F组14种差异性代谢产物分别为:亚硫酸盐、3-磷酸甘油醛、TG(54:2)、α-氨基丁酸、alpha-CEHC、谷氨酰丙氨酸、视黄醛、3-羟基甾醇、十四碳烯酸、MG(21:0/0:0/0:0)、十三酸、肉豆蔻酰甘氨酸、二十八烷酸、TG(53:4)。其中亚硫酸盐为三组分组均筛选出的差异性代谢产物,亚硫酸盐、谷氨酰丙氨酸、TG(54:2)、alpha-CEHC、α-氨基丁酸和3-磷酸甘油醛为A/B组与E/F组均筛选出的差异性代谢产物。结论:1.浆膜受侵犯组与浆膜未受侵犯组的患者腹腔灌洗液代谢产物存在明显差异;发生腹膜转移组与未发生腹膜转移组的胃癌患者腹腔灌洗液代谢产物存在明显差异;CEA阳性组与CEA阴性组的患者腹腔灌洗液代谢产物存在明显差异。2.亚硫酸盐在三种分组中均存在差异性表达;亚硫酸盐、TG(54:2)、3-磷酸甘油醛、谷氨酰丙氨酸、α-氨基丁酸和alpha-CEHC在浆膜受侵犯组与浆膜未受侵犯组,CEA阳性组与CEA阴性组中均存在差异性表达。推论:亚硫酸盐、TG(54:2)、3-磷酸甘油醛、谷氨酰丙氨酸、alpha-CEHC和α-氨基丁酸可能是诊断胃癌腹膜转移的重要潜在生物标记物。
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