纤溶酶产生菌是天然维生素K2的重要生产菌。本文对实验室保藏的六株纤溶酶高产菌的维生素K2合成能力进行了检测和比较,以合成维生素K2能力最强的菌株作为研究对象并对其合成维生素K2的发酵条件进行了优化,最后研究了过表达维生素K2合成途径中的主要酶基因对维生素K2产量的影响。主要内容和结论如下：(1)以实验室保藏的6株纤溶酶高产菌作为出发菌,经摇瓶培养后检测其中的维生素K2含量,其中菌株Y-2的维生素K2产量最高,达到了7.09mg·L-1,经形态学和分子生物学鉴定,菌株Y-2属于解淀粉芽孢杆菌。(2)对菌株Y-2合成维生素K2的摇瓶培养条件进行了优化。结果表明菌体在静置培养状态下比在摇瓶培养状态下能够合成更多的维生素K2；同时发现玉米粉经过高温淀粉酶液化之后非常适合作为合成维生素K：的碳源。将Y-2在优化后的条件下培养6d,维生素K2产量由7.09mg·L-1提高到了67.22mg·L-1,达到了国际先进的水平(3)对经典的spizizen转化法进行改进,成功实现了重组质粒对野生型解淀粉芽孢杆菌Y-2的转化。在此基础上对菌株Y-2维生素K2合成途径中的6个酶基因分别进行了克隆和表达,探索不同酶基因对维生素K：产量的影响。结果表明分别过量表达这6个基因均能提高维生素K：的产量,其中hep S基因对维生素K：产量的影响最大,过表达后摇瓶培养组的产量提高了38%,静置培养组的产量提高了48%；其余几个基因过表达后对维生素K：产量的影响则根据培养方式的不同而各有差异。