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目的:近年来一些组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histon deacetylase inhibitor, HDACi)作为抗肿瘤药物的研究日益增多。曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)是链霉素代谢产物,是HDACi的经典代表药物之一,对肝癌、胃癌、宫颈癌、前列腺癌及神经母细胞瘤等肿瘤细胞具有明显的抑制增殖,诱导分化和/或促进凋亡的作用。另外,TSA可以诱导MHC II类分子,CD40和B7-1/2表达从而增强抗肿瘤免疫。MHCⅠ类链相关分子A/B(MHC classⅠchain-related molecule A/B, MICA/B)作为一种新发现的免疫刺激性分子,在抗肿瘤免疫过程中起着重要作用。本实验拟研究TSA对不同肝癌细胞株和正常肝细胞株增殖和凋亡的作用以及对MICA/B表达的影响,以了解TSA抗肝癌的机制。另外,在我国,HBV感染是原发性肝癌的主要原因之一,原发性肝癌常常合并HBV感染,因此本实验还初步研究了TSA对HBV复制的影响,旨在为临床应用TSA治疗肝癌的安全性,合理性提供实验依据。方法:本实验应用四氮唑蓝(MTT)法,DNA琼脂糖凝胶电泳检测经不同浓度TSA处理后的3种肝癌细胞株HepG2、QGY7701、HepG2.2.15和正常肝细胞株L02,观察细胞增殖和凋亡的改变。用激光共聚焦显微镜、定量RT-PCR和流式细胞术检测MICA/B在TSA刺激前后肝癌细胞株中的表达变化。用微离子酶联免疫法检测TSA处理组和对照组HepG2.2.15细胞上清中HBsAg和HBeAg的含量,实时荧光定量PCR检测细胞上清中HBV DNA水平,初步探讨TSA对HBV复制的影响。结果:TSA在一定浓度范围内能明显抑制不同肝癌细胞株的增殖,呈时间剂量依赖关系。对正常肝细胞株L02的增殖无明显影响。DNA凝胶电泳结果显示:在TSA处理组的3种肝癌细胞株HepG2、QGY7701、HepG2.2.15中可观察到细胞凋亡特异的DNA梯形带,而在对照组及正常肝细胞株中未见DNA梯形带。定量RT-PCR结果显示TSA能够诱导MICA/B的表达,激光共聚焦显微镜和流式细胞术检测结果表明经TSA刺激后的肝癌细胞MICA/B的表达量明显高于对照组。经TSA处理后的HepG2.2.15细胞上清中HBsAg、HBeAg及HBV DNA的含量均高于对照组1倍以上。结论:组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA可抑制肝癌细胞增殖并诱导凋亡,上调MICA/B的表达,对正常的肝细胞作用不明显,是很好的抗肿瘤药物之一。但是,TSA刺激HBV的复制。因此,对HBV阳性的肝癌患者,应尽量避免使用TSA。