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背景和目的宫颈癌(cervical carcinoma)是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一。宫颈癌的治疗主要以手术治疗为主、放化疗为辅,但是手术的创伤和放化疗的副作用严重限制了患者的治疗效果和生活质量。因此,积极探索通过中药等治疗宫颈癌的可行性具有重要的现实意义。黄芪是常用的滋补中药,始载于东汉《神农本草经》,黄芪多糖(astragalus polysaccharide, APS)是黄芪的主要活性成分之一。研究发现,APS对肝癌、乳腺癌、胃癌、白血病等恶性肿瘤细胞的生长有抑制作用。但国内外尚未见APS对宫颈癌C-33A细胞增殖影响的研究报道。本研究旨在探讨APS对人宫颈癌C-33A细胞增殖的影响及相关机制,为APS在宫颈癌治疗中的应用提供理论和实验依据。方法1.制备APS水溶液并定量,2.通过四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)比色方法绘制细胞生长曲线,观察APS对宫颈癌C-33A细胞生长速度和倍增时间的影响。3.通过流式细胞术观察APS对宫颈癌C-33A细胞周期分布的影响；通过平板克隆形成实验观察APS对宫颈癌C-33A细胞克隆形成的影响。4.通过Western blotting方法检测APS处理前后细胞周期蛋白A、B、E(cyclinA、B、E)和p21等细胞增殖相关基因表达的的变化。结果1.提取的APS的浓度为51.514mg/mLo2.MTT比色法绘制细胞生长曲线结果显示：与对照组相比,100μg/mL、200μg/mL和400μg/mL APS处理的C-33A细胞生长速度均明显减慢(P<0.01),倍增时间显著延长(P<0.01)。从上述实验结果可以看出200μg/mL和400μg/mL的APS均能显著抑制C-33A细胞的生长速度并延长其倍增时间,结合实验中观察到的细胞状态,后续实验中均以200μg/mL的APS诱导48h的C-33A细胞为实验组,以不加药的C-33A细胞为对照组。3.流式细胞术结果显示：与对照组相比,APS组C-33A细胞出现明显的G1期阻滞(P<0.01),S期和G2/M期细胞比例显著减少(P<0.01)。4.平板克隆形成实验结果显示：与对照组相比,APS组C-33A细胞的克隆形成均数显著降低(P<0.01),且克隆体积较小。5. Western blotting结果显示：与对照组相比,APS组C-33A细胞中cyclin B和cyclin E的表达显著降低(P<0.05或0.01),p21的表达显著增加(P<0.01),而cyclinA的表达差异无显著性(P>0.05)。结论1.APS可显著抑制宫颈癌C-33A细胞的增殖能力。2.APS诱导宫颈癌C-33A细胞中cyclin B和cyclin E表达下调以及p21表达上调可能是APS抑制宫颈癌C-33A细胞增殖的重要机制。