MR靶向肿瘤血管生成特异性分子探针构建及其应用

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目的应用GoldMagTM-CS纳米金磁微粒标记含RGD序列的环形五肽(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-右旋苯丙氨酸-赖氨酸cyclic arginine-glycine -aspartic- D-phenylalanine-lysine c(RGDfK))构建靶向肿瘤新生血管的特异性分子探针并探讨其在体内、外MR成像的可行性。方法通过GoldMagTM-CS纳米金磁微粒与c(RGDfK)应用非共价键偶联方法构建特异性分子探针(RGD@GOLDMag)。培养并通过细胞免疫化学染色法、流式细胞术和免疫荧光法检测ECV304细胞上整合素αvβ3的表达,利用流式细胞术观察RGD@GOLDMag与ECV304细胞结合的特异性。建立MR扫描序列,用构建的探针孵育ECV304细胞后,利用临床应用的3.0T磁共振扫描仪进行MR成像,观察其对磁共振信号的影响。建立裸鼠的肝癌皮下移植瘤模型,利用免疫组化法检测肿瘤内整合素αvβ3的表达。将15只建模成功的裸鼠随机平均分为阳性组(注射RGD@GOLDMag)、阴性对照组(注射无关抗体和金磁颗粒耦合成的探针)和竞争对照组(预先注入c(RGDfK),半小时后再注射RGD@GOLDMag)。分别经尾静脉注射,利用临床应用的3.0T磁共振扫描仪及动物专用线圈进行MR成像,观察活体内其对肿瘤新生血管的显示情况,阳性组与相应肿瘤组织切片的免疫组化检查结果对照。结果成功构建了靶向血管生成的特异性MR分子探针;构建的MR分子探针能与整合素αvβ3表达阳性的ECV304细胞特异性的结合;并可显著降低T2*序列MR信号。活体肿瘤内检测到了整合素αvβ3的表达,活体内RGD@GOLDMag注射半小时后,T2*WI移植瘤的MR信号明显降低,竞争对照组及阴性对照组信号无明显改变。阳性组磁共振信号改变与相应的免疫组化检查结果相一致。结论应用纳米金磁微粒及c(RGDfK)成功构建了MR分子探针,并在3.0T MR扫描仪上特异性地显示出肿瘤的新生血管,本研究结果有望用于临床活体肿瘤新生血管的特异性显像。
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