论文部分内容阅读
背景阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease, AD)是以神经退行性综合症为病理特征的持续性神经系统功能障碍。小神经胶质细胞对于AD的发生发展起到关键作用,它们能够保护神经细胞,清除多余的β淀粉样蛋白沉积。但同时β淀粉样蛋白沉积也会引起小神经胶质细胞的损伤和凋亡,中和β淀粉样蛋白的沉积有助于缓解病情的发展。先前的研究发现西洋参皂甙能够改善老年痴呆大鼠的学习记忆能力,但对于具体机制尚不明确。目的观察西洋参茎叶总皂苷(Panax quinquefolium saponins, PQS)对β-样淀粉蛋白诱导的EOC2细胞损伤的保护作用并探讨其可能存在的机制。方法本实验按完全随机设计方法将复苏后的EOC2细胞分为5组,每组6例,共30例。分别为：空白对照组、不同浓度PQS(0ug/mL,40ug/mL,160ug/mL,640ug/mL)均培养4h后,空白对照组加入0.9%Nacl,其余各组使用A β25-35建立阿尔茨海默病细胞模型继续培养48h。使用CCK-8法检测各组细胞存活数,利用ELISA法检测PQS对EOC2细胞中超氧化物歧化酶(SOD)表达量。免疫荧光染色检测细胞线粒体膜电位变化,流式细胞术检测凋亡细胞数量,免疫蛋白印记技术检测Bax,Bcl-2的蛋白表达量。结果1.各组的细胞存活数具有统计学差异(P<0.01),且任意两组间EOC2细胞的存活数均不同,均有统计学差异(P<0.01)。2.各组细胞的凋亡数量率显著减少,具有统计学意义。3.各组细胞线粒体膜电位不同,具有统计学差异(P<0.01)。且任意两组间EOC2细胞的存活数均不同,均有统计学差异(P<0.01)；4.不同组间SOD的表达有统计学差异(P<0.01),且任意两组间EOC2细胞的存活数均不同,均有统计学差异(P<0.01)。5.各组Bax蛋白表达不同,具有统计学差异,且随PQS浓度的增加Bax蛋白表达量减少；各组Bcl-2蛋白表达不同,具有统计学差异,且随PQS剂量的增加Bcl-2蛋白表达增多。结论1.PQS能够增加Ap诱导损伤的EOC2细胞的存活数,2.PQS能够提高EOC2细胞SOD含量、使细胞线粒体膜电位下降水平减弱、减少细胞凋亡、降低Bax蛋白表达、增加Bcl-2蛋白的表达。3.通过实验结果推测,PQS对Aβ诱导损伤的对EOC2细胞保护作用机制可能是PQS增加了抗氧化物(SOD)表达、保护线粒体膜电位、增加抑凋亡蛋白表达,使细胞凋亡数量减少,进而促进细胞存活。