小儿急性淋巴细胞白血病血清CD3+CD4-CD8-T细胞和T亚群的变化及临床意义

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目的探讨小儿急性淋巴细胞白血病(ALL)外周血CD3+CD4-CD8-T细胞(DNT细胞)及T淋巴细胞亚群的变化及意义。材料与方法1实验对象:30例ALL患儿及24例正常对照组小儿。2检测指标:①染色:将ALL患儿和健康对照组儿童分组后,分别抽取其外周血各1m1,注入两试管中,然后在两试管加入枸橼酸钠抗凝。再分别加入抗体(CD45-FITC/CD4-PE/CD8- ECD/CDPC5和CD45-FITC/CD56-PE/CD19- ECD/CD3PC5)10μl于上述的试管中,再加20μl经抗凝处理的全血并摇晃混匀,然后避光孵育约半小时在正常室温下。②溶血:用量器量取100μl溶血素,加入上述的两个管中,摇晃并充分混匀,然后放置约15分钟,用离心机(1200转/分)离心10分钟,将上清液轻轻倒掉。③洗涤:再分别加缓冲液2m1于上述的两个试管中,混匀并用离心机离心,转速同上,再次将上清液弃掉。④上机待检:用移液管量取0.5m1缓冲液,加入以上操作好的试管中,上机进行检测。从以上处理好的样本中分别取10000个细胞,用实验室的流式细胞仪对标本中的DNT细胞、CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞的表达率进行检测。3数据处理::统一用统计学软件(SPSS13.0)进行检测和精确的分析,最后获取的结果统一采用均数土标准差的形式进行表示,然后用统计学中的t检验模式,对两组结果进行比较分析,并且把p<0.05作为差别有统计学意义。结果DNT细胞、CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞百分比均明显低于对照组,分别为(4.93±3.75)%对比(8.19±3.21)%(t=3.4 P<0.01);(49.99±11.70)%对比(64.13±11.39)%(t=4.1P<0.01);(28.30±7.56)%对比(34.61±6.43)%(t=3.2 P<0.01);而CD3+CD8+ T细胞百分比明显高于对照组,为(31.19±9.89)%对比(24.33±4.24)%(t=3.1 P<0.01)。结论ALL患儿外周血DNT细胞及T亚群的变化,这一变化提示我们急性淋巴细胞白血病体内可能有免疫功能紊乱,这可能与ALL的发病机制有关。
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