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目的：采用高效液相色谱法（HPLC）筛选了竹节参皂苷中具有免疫佐剂效果的有效部位，进而研究并探讨了此有效部位作为HBsAg抗原佐剂的作用及可能机制，为竹节参皂苷作为免疫佐剂的开发研究奠定基础。 方法：⑴通过D101大孔吸附树脂和HPLC进行竹节参皂苷成分的初步分离和分析；⑵体外无菌分离小鼠脾淋巴细胞，培养、给药，MTT法检测不同浓度乙醇洗脱的竹节参皂苷中具有最佳免疫佐剂活性的部位；⑶取6周雌性Balb/c小鼠54只，随机分为6组，每组9只：正常组（Z）、抗原组（HBsAg，5μg/只）、抗原+60％乙醇洗脱的竹节参皂苷低剂量组（HBsAg+60%低，300μg/只）、抗原+60%乙醇洗脱的竹节参皂苷高剂量组（HBsAg+60%高，600μg/只）、抗原+人参皂苷rg1低剂量组（HBsAg+rg1低，50μg/只）、抗原+人参皂苷rg1高剂量组（HBsAg+rg1高，100μg/只）；分别在第0、7和21天皮下接种疫苗，各组分别给予生理盐水、HBsAg、HBsAg+60%低、HBsAg+60%高、HBsAg+rg1低和HBsAg+rg1高，末次免疫7天后颈椎脱臼处死老鼠；CCK-8法检测抗原HBsAg和ConA诱导小鼠淋巴细胞增殖的情况；间接ELISA法检测小鼠血清中IgG、IgG1和IgG2b抗体滴度；RT-PCR法检测细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10的表达量；流式细胞仪检测细胞表面蛋白TLR4和TLR9的表达。 结果：①实现了竹节参皂苷中各段物质的分离及确定了各段竹节参皂苷中所含的主要成分：30%段皂苷为极性较强的糖类物质，60%段皂苷为齐墩果烷型皂苷和达玛烷型皂苷，90%段几乎全部为齐墩果烷型皂苷；②MTT法初步确定了竹节参皂苷中60%段具有最强的免疫活化活性（P<0.01）；③竹节参皂苷和人参皂苷rg1能够增强HBsAg抗原诱导的小鼠淋巴细胞增殖（P<0.05）；竹节参皂苷和人参皂苷rg1能够显著增强小鼠血清中抗HBsAg的IgG、IgG1和IgG2b亚型抗体滴度（P<0.05）；竹节参皂苷和人参皂苷rg1能够上调细胞因子IFN-γ、IL-4和IL-10的表达量（P<0.05）；竹节参皂苷和人参皂苷rg1作为疫苗佐剂显著增强TLR4受体的表达（P<0.05），对TLR9无显著影响（P>0.05）。 结论：⑴竹节参皂苷中不同成分得到基本的分离；⑵竹节参皂苷中60%段免疫作用最显著；⑶竹节参皂苷通过细胞免疫（Th1）和体液免疫（Th2）来协同发挥佐剂作用。