背景与目的许多恶性肿瘤包括胃癌的发生均与基因的突变有关,如癌基因的激活或抑癌基因的失活。近年来我国胃癌发生率逐渐增加,其死亡率约占癌症死亡率的1／4,手术是早期胃癌及原位癌的主要治疗手段,然而术后大部分患者发生原位复发或远处转移。近半世纪来各种临床研究致力于研究胃癌的化疗,如氟尿嘧啶、顺铂、紫杉醇等化疗药物都对胃癌有一定的疗效,但是这些药物单药或联合化疗有效率不到50%。Aktl(丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶,serine-threonine kinase),又称蛋白激酶B(PKB),在细胞的增殖、代谢以及肿瘤发生等生物学过程中都具有非常重要的作用。哺乳动物中Akt有三种亚型：Akt1 (PKBα), Akt2(PKBβ)和Akt3(PKBγ),三种亚型在人类的多数组织中都有不同水平的表达,其作用也不同,Aktl可抑制凋亡和促进细胞生长、促进胎盘发育和细胞生长,同时参与糖代谢过程。Akt2则主要在糖代谢中发挥重要作用,目前有研究报道Akt2在结肠癌的转移中起到重要的作用。但Akt3在体内体外研究报道较少。Akt在多种肿瘤中被激活或高表达,胰腺癌、甲状腺癌、结肠癌等肿瘤中均发现有Akt的活化或高表达。ERCC1(核苷酸切除修复交叉互补基因,excision repair crosscomplementing 1)定位于19q13.2,是核苷酸外切修复酶家族中的重要成员之一,是细胞存活必须的DNA修复基因,具有损伤的识别和切除功能,其表达的高低能反映整个DNA切除修复(Nuclleotide excision repair, NER)活性的水平,也是铂类诱导DNA损伤修复中关键酶,与铂类耐药密切相关。近年来有研究提出组织中ERCC1的高表达与铂类耐药有关,与预后密切相关,对治疗胃癌化疗方案的选择提供了依据,AKT1与肿瘤细胞的生长、增殖、促进细胞侵袭和转移,促进血管形成密切相关,同时有资料显示AKT1高表达与化疗耐药有关。由于个体之间的差异性,术后辅助化疗仅有少部分患者从中受益,找到特定基因的改变作为敏感性和耐药性的标志,提示预后,可使治疗更加具有针对性、提高疗效、避免不必要的毒副反应。本研究应用RT-PCR的方法检测胃癌组织及癌旁组织中ERCC1及AKT1的表达规律,以了解ERCC1、AKT1的临床意义,为肿瘤的检测与治疗提供新的途径。材料与方法取2008年3月至2009年3月在我院手术治疗的胃癌患者51例(男32例,女19例),年龄34-71岁(中位年龄57岁)。选取这些患者手术切除的肿瘤组织、癌旁组织,手术多采取胃癌根治术,术式多采用D2毕Ⅰ式、毕Ⅱ式或胃空肠Roux-en-Y吻合术,不能行根治术的患者行姑息性手术,组织置于-196℃液氮中保存。其中Ⅰ期(T1NoMo 7例,T1N1Mo 5例,T2NoMo 9例)21例,Ⅱ期(T1N2Mo 2例,T2N1Mo 3例,T3NoMo 7例)12例,Ⅲ期(T2N2Mo 3例,T3N1-2Mo 9例,T4NoMo 2例)14例,Ⅳ期(T4N3M11例,T2N2M11例,T4N3M11例,T4N2M1 1例)4例。分期按TNM国际分期(UICC,1997)制订标准。用PT-PCR方法检查胃癌及癌旁组织中ERCC1与Aktl的表达情况,以β-actin作为内参,其平均表达水平为6.1×103,以ERCC1、Aktl表达水平≥6.1×103为高表达(阳性),以mRNA表达水平≤6.1×103为低表达(阴性)。Ⅰ期手术后部分不化疗,Ⅱ-Ⅳ期手术后作化疗,采用DDP+5-FU+EPI或奥沙利铂+5-FU方案,每21天为一周期,连续4-6周期。随访至2009年10月,观察ERCC1、Aktl的表达在有无淋巴结转移、不同分期中的差异及与预后的关系。结果1.癌旁组织中ERCC1、Aktl的表达均高于癌组织。2.有淋巴结转移者ERCC1、Aktl的表达高于无淋巴结转移者。3.将Ⅰ期、Ⅱ-Ⅳ期分组后,Ⅰ期ERCC1(+)、Aktl(+)表达者的预后明显好于ERCC1(-)、Aktl(-)表达者,其中ERCC1、Aktl均阳性者预后好于均阴性者。而Ⅱ-Ⅳ术后化疗者ERCC1、Aktl均阴性者预后好于均阳性者。结论1.ERCC1、Aktl在癌旁组织中阳性表达率明显高于胃癌组织,无淋巴结转移者表达率高于有淋巴结转移者P<0.05,在癌组织及癌旁组织、有无淋巴结转移者ERCC1、Aktl表达的对比中显示ERCC1、Aktl的低表达与癌症的发生、淋巴结转移有关。ERCC1、Aktl的表达可能与预后呈正相关。2.Ⅱ-Ⅳ期病人ERCC1、Aktl均低表达者PFS明显长于高表达者,而Ⅰ期病人ERCC1、Aktl高表达者PFS长于低表达者,可说明ERCC1、Aktl高表达者对应用铂类+5-FU敏感性低,可能与对铂类、氟尿嘧啶类药物产生的基因损伤有修复作用有关,高表达患者应用铂类+5-FU不能延长PFS。3.ERCC1和Aktl在不同分期的胃癌患者中作用机制不同,与预后及耐药联系密切,在分子水平对其变化进行检测可帮助了解胃癌患者的肿瘤恶性程度,指导制定个体化治疗方案并判断预后。