【摘 要】
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目的:micro RNAs（miRNAs）的异常表达谱在包括白血病在内的多种癌症类型中具有重要作用。miR-520a在卵巢癌、肺癌、慢性粒细胞白血病等许多癌症中表现出抑癌因子的作用,而在急性髓细胞白血病中上调miR-520a可能预示不良预后,其在急性淋巴细胞白血病中未见报道。本文旨在观察miR-520a在急性B淋巴细胞白血病细胞中的表达及对白血病细胞增殖的影响,探讨miR-520a靶向调控微小染色
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目的:micro RNAs（miRNAs）的异常表达谱在包括白血病在内的多种癌症类型中具有重要作用。miR-520a在卵巢癌、肺癌、慢性粒细胞白血病等许多癌症中表现出抑癌因子的作用,而在急性髓细胞白血病中上调miR-520a可能预示不良预后,其在急性淋巴细胞白血病中未见报道。本文旨在观察miR-520a在急性B淋巴细胞白血病细胞中的表达及对白血病细胞增殖的影响,探讨miR-520a靶向调控微小染色体维持蛋白3（MCM3）的表达对白血病细胞增殖的影响。方法:利用实时荧光定量PCR检测miR-520a在非恶性血液肿瘤患者骨髓淋巴细胞和急性B淋巴细胞白血病患者骨髓淋巴细胞及正常人外周血淋巴细胞、急性B淋巴细胞白血病细胞BALL-1中的表达;使用miR-520a mimics转染BALL-1细胞,CCK-8检测方法观察细胞增殖能力变化;采用蛋白印迹法（Western blot）检测不同组织以及转染miR-520a mimics后MCM3的表达情况。生物信息学方法分析MCM3是miR-520a的靶基因,并预测其作用位点;使用双萤光素酶报告基因系统检测miR-520a对MCM3的转录活性影响;在miR-520a mimics组中使用MCM3过表达质粒进行回补实验,观察其对细胞增殖的影响。结果:同正常细胞相比,miR-520a在急性B淋巴细胞白血病患者骨髓淋巴细胞/BALL-1细胞系中表达水平显著降低（P<0.001）,miR-520a过表达能够使BALL-1细胞增殖能力降低（P<0.001）;MCM3在急性B淋巴细胞白血病患者骨髓原始淋巴细胞/BALL-1细胞系中表达水平显著增高（P<0.001）,miR-520a过表达降低MCM3的蛋白表达水平（P<0.001）;通过间接和直接实验验证miR-520a能够作用MCM3的3’UTR区;miR-520a mimics能够使BALL-1细胞增殖能力下降,同时过表达MCM3能够提高细胞增殖能力。结论:miR-520a过表达能够显著下调MCM3蛋白表达;miR-520a可能通过下调MCM3的表达抑制急性B淋巴细胞白血病细胞增殖能力,可能为急性B淋巴细胞白血病治疗提供新的靶点。
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