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目的:本实验主要检测基因ZNF545在人结直肠癌细胞株和结直肠癌组织中的表达情况、甲基化状态,研究基因ZNF545对结直肠癌细胞的增殖、克隆形成、凋亡和周期等功能影响,并初步探讨ZNF545是通过何种机制发挥抑癌功能。方法和结果:1、通过逆转录PCR(RT-PCR)检测ZNF545在结直肠癌细胞中的表达情况,结果显示其mRNA在癌细胞中表达降低或缺失。2、通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测ZNF545在32对结直肠癌组织和对应癌旁组织中的表达水平,结果显示其在结直肠癌组织中的表达普遍低于癌旁组织,且具有统计学意义。3、甲基化特异性PCR(MSP)检测ZNF545在32例原位结直肠癌组织和6例正常结直肠组织中的启动子甲基化状态,结果显示癌组织中的甲基化率比正常组织中的甲基化率高(p=0.0116);对结直肠癌细胞去甲基化处理后,ZNF545 mRNA表达均有不同程度的恢复。4、将ZNF545质粒转染到表达缺失的SW480和HT-29细胞中,用MTS细胞增殖实验、克隆形成实验和流式细胞仪检测过表达ZNF545对结直肠癌细胞的增殖、凋亡和周期等的影响,结果显示ZNF545基因能抑制结直肠癌细胞增殖和克隆形成,促进癌细胞凋亡,阻滞细胞周期于G0/G1期;裸鼠体内实验证实ZNF545能抑制结直肠癌细胞在体内的生长。5、采用蛋白免疫印迹技术(Western-blot)分析ZNF545对Wnt/β-catenin和PI3K/AKT通路的影响,了解其在结直肠癌中可能的作用机制,结果示ZNF545可能通过Wnt/β-catenin和PI3K/AKT信号通路影响细胞生物学功能。结论:在结直肠癌细胞和组织中,ZNF545可受甲基化调控作用而表达降低;能抑制癌细胞增殖和克隆形成能力,诱导细胞凋亡和G0/G1期阻滞,且能抑制结直肠癌细胞的体内生长,提示其在结直肠癌中为抑癌基因。其可能是通过影响Wnt/β-catenin和PI3K/AKT信号通路来发挥抑癌功能。ZNF545可能成为未来结直肠癌研究中的生物标记物和治疗靶基因。