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目的优化高分子超声微泡造影剂的制备条件,以制备浓度高、粒径适宜且分布均匀、稳定性好的微泡,并探讨心脏挤压、毛细血管挤压、超声辐照、温度、血浆成分、血循环压力等因素对微泡半衰期的影响。方法1.采用单乳化法制备包裹全氟戊烷的高分子微泡超声造影剂,单因素试验考察制备高分子微泡制备过程中三个条件,包括高分子聚合物与液态氟碳的质量/体积比、电动内切匀浆的转速、匀浆时间,以微泡单位体积数目和粒径大小及分布为评价指标,筛选出最佳制备条件。观察优化条件制备的高分子微泡形态、粒径大小,将其置于4℃条件下24小时,采用细胞计数板在显微镜下计数微泡数量以评价体外稳定性。2.将优化条件制备的高分子微泡超声造影剂在低机械指数超声造影下观察体外水囊显影效果,并行新西兰大白兔肾脏超声造影,TCA软件分析造影的始增时间、达峰时间、峰值降半时间及峰值强度等参数。3.通过建立离体蛙心灌流模型,将任氏液稀释高分子微泡从静脉插管注入,0.5、3min时收集并观察经过蛙心泵出的微泡形态、浓度以评价蛙心对微泡的作用,并设未经蛙心的对照组进行比较。而为验证毛细血管的作用,建立体外兔肾脏毛细血管模型,观察灌注前、灌注不同次数后微泡的浓度及形态变化,并行兔肾动、静脉造影,TCA软件分析造影参数以进一步验证。4.为探讨压力、温度、血浆成分对高分子微泡的影响,依次建立体外压力模型,设立了压力为110mmHg的实验组与不加压的对照组;将高分子微泡分别置于4℃、39.4℃恒温水浴中;将高分子微泡均置于39.4℃,设立加入兔血浆的实验组与加入生理盐水的对照组,均以不同时间(0、5、10、30min)微泡的形态、浓度及粒径变化评价此三因素对高分子微泡的作用。5.为评价超声对微泡的作用,将高分子微泡加入密闭自封袋内行超声造影检查,设置不同MI以观察不同MI对高分子微泡造影回声强度变化的影响;设置不同频率以评价不同超声频率对高分子微泡造影回声强度变化的影响。结果1.高分子聚合物与液态氟碳的质量/体积比为2/1、匀浆转速为26 000 rpm、匀浆时间为60 sec优化条件下制备的微泡呈乳白色悬浊液,显微镜下观察呈圆形微泡,平均粒径(3.9±1.1)μm,分布较均匀,浓度(1.72±0.33)×109/ml。微泡体外于4℃放置24小时后的浓度与刚制备的微泡浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2.优化条件制备的微泡在水囊中回声明显增强,超声爆破后,回声瞬间减低为无回声。新西兰大白兔肾脏造影始增时间为3.1±0.6 sec,达峰时间为5.2±0.8 sec,峰值降半时间为4.0±0.7 sec,峰值强度为(4.7±1.1)×10-5 AU。3.经过蛙心组高分子微泡浓度较对照组降低,差异虽无统计学意义,但经蛙心组显微镜下可见微泡变形。经兔肾毛细血管挤压后高分子微泡浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05),而肾动脉造影AUC为肾静脉AUC的1.23倍,差异无统计学意义(P>0.05)。4.30 min内不同温度组、不同压力组和加血浆组与生理盐水组之间微泡浓度及粒径变化均不明显,差异无统计学意义(P>0.05)5.随着作用时间延长,超声机械指数增大,超声频率降低,高分子微泡造影回声强度降低幅度增大。结论优化条件制备的高分子微泡浓度高,粒径适宜且分布均匀,体外稳定好,体内外造影效果好。心脏挤压、毛细血管挤压、超声辐照等都是高分子微泡半衰期的影响因素,而温度、压力、血浆对高分子微泡体内半衰期影响较小。