近交系小耳猪复合异种骨移植局部TNF-α,IL-6和IL-8 mRNA表达的实验研究

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目的 观察不同抗原性近交系小耳猪松质骨载体与不同剂量小耳猪BMP(sepBMP)复合,在异种骨移植局部TNF-α、IL-6和IL-8 mRNA的表达规律,探讨小耳猪异种复合骨的细胞免疫学特性。 方法 将近交系小耳猪松质骨制备成不同抗原性载体,并与小耳猪BMP(sepBMP)复合,植入小鼠股部肌袋,于术后5天、10天和20天取材,制备石蜡切片,采用HE染色和核酸分子原位杂交的方法,对植骨局部进行组织学观察,检测植骨局部TNF-α、IL-6和IL-8 mRNA表达情况,通过图象分析,确定TNF-α、IL-6和IL-8 mRNA表达强度,分析不同抗原性松质骨载体在植骨局部TNF-α、IL-6和IL-8 mRNA的表达规律及不同剂量sepBMP对TNF-α、IL-6和IL-8 mRNA表达的影响。 结果 植骨术后5天、10天和20天,各组植骨局部均可检测到TNF-α、IL-6和IL-8 mRNA阳性表达,单纯载体组、载体与2mg sepBMP复合组、载体与4mg sepBMP复合组三组中,均以新鲜松质骨载体组在术后不同时间点表达最强,部分脱抗原及完全脱抗原松质骨载体组最弱(P<0.05),而相应各组部分脱抗原与完全脱抗原松质骨载体间均无显著性差异(P>0.05)。新鲜松质骨、部分脱抗原及完全脱抗原松质骨载体组均以未复合sepBMP组在术后不同时间点TNF-α、IL-6和IL-8表达最强,复合2mg sepBMP及4mgsepBMP组较弱,P<0.05。组织学观察:单纯植入载体组均未见软骨细胞,新鲜松质骨载体复合sepBMP 2mg、4mg组均有少许软骨细胞,且20天昆明医学院硕士论文 比10天时稍有增多,部分脱抗原及完全脱抗原松质骨载体复合sePBMP组 均在10天、20天时有软骨细胞、骨细胞、类骨组织、原始骨髓腔、骨髓 形成。结论部分脱抗原及完全脱抗原松质骨载体复合sePBMP呈现低免疫原性及 良好的骨诱导能力;TNF一a、IL一6和IL一8 mRNA在异种骨移植局部多种细 胞内表达,提示TNF一a、IL一6和IL一8可能是植骨局部细胞免疫调节的重要 细胞因子;外源性sePBMP在异种骨移植局部对TNF一a、IL一6和IL一8 mRNA 表达有抑制作用,提示sePBMP在植骨局部有诱导成骨和免疫调节双重作 用。
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