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近年来,由于畜禽养殖粪便处理的不当,各种工业生产的污废水随意排放,导致雌激素类污染物的肆意扩散,对环境和人类的生产生活产生影响。雌激素类污染物作为新型环境污染物,已成为环境研究的热点话题。而17β-雌二醇是典型的环境雌激素。本文从长春市及周边地区的十余个畜禽养殖厂,在长期堆放粪便下的土壤、化粪池,粪尿池中采集得到50余样品,通过驯化富集,从中分离得到一组高效降解17β-雌二醇(E2)的复合菌。通过单株菌株以及复合菌对E2降解的比较实验得出最佳优势复合菌,对两株菌株进行鉴定,通过对环境影响因子的研究,分析复合菌的最佳生长条件,以及两种菌株混合比例。通过降解动力学拟合方程,确定最佳参数,对复合菌的降解机制进行初探,并将理论研究与实际应用相结合,研究结果如下:1、经过多次驯化培养与分离纯化,从采集的样品中筛选一组对E2有较高降解能力的复合菌。分别命名为LM1、LY1,通过VITEK2鉴定以及系统发育树基于16S r RNA构建的系统发育树表明,菌株LM1和LY1与乙酸钙不动杆菌和假单胞菌相似性较高。2、将菌株LM1和菌株LY1与睾丸酮丛毛单胞菌(ATCC1196)对E2的降解进行比较,研究结果显示,在第8天左右,菌株LM1和菌株LY1生长均能达到稳定,OD600(细菌细胞密度)分别为0.52、0.541,而菌株ATCC1196在前8天生长都较为迟缓,在第11天生长进入稳定期,OD600达到0.571。在培养11天后,菌株LM1和菌株LY1降解E2的降解率分别为64.22%,78.24%,而菌株ATCC1196降解率为82.10%,说明菌株ATCC1196利用E2效果较好。3、将复合菌和单一菌株对E2的降解效果进行比较研究,研究结果显示,复合菌LM1和LY1(MY)生长最快,OD600最高时为1.221,复合菌LM1、LY1和ATCC1196(MYA)的OD600最高时为0.886,菌株ATCC1196(AT)降解过程中,OD600最高达到0.571。在培养11天后测定E2浓度,复合菌MY降解E2的降解率为97.12%,复合菌MYA降解E2的降解率为94.7%,菌株AT降解E2的降解率为82.1%。实验结果表明,复合菌MY对E2的降解效果好于其他组合的复合菌,并且与单一菌株降解E2进行比较,复合菌MY对E2的降解能力也高于单一菌株对E2的降解能力,因此复合菌MY对E2的降解有较高应用价值。4、E2不同浓度对复合菌MY的生长以及对E2降解的影响,研究结果显示,当E2添加浓度为1mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L时,复合菌MY的OD600最大分别为0.581、1.475、1.435、1.401,培养8天后E2降解率分别为99.31%、96.95%、93.12%、85.21%。实验结果表明,随着E2添加浓度的逐渐升高,复合菌MY降解E2的降解率逐渐下降。通过降解动力学拟合方程,与一级降解动力学方程拟合效果最好,R2都在0.91以上,所得的降解动力学均能较好的反应复合菌MY对E2的降解趋势,降解半衰期为1.26、1.35、1.56、1.94d,当E2的浓度为1~10mg/L时,降解速率常数均大于0.4,半衰期都小于两天,当E2的浓度升高到20mg/L时,降解速率常数下降为0.357,半衰期增加为2.01天。说明高浓度的E2对复合菌MY的降解起到抑制作用。5、将菌株LM1与菌株LY1以不同比例混合,混合比分别为10:1、5:1、1:1、1:5、1:10,结果表明,两种菌株在培养过程中数量可以自动调节,在培养第8天后,菌株LM1与菌株LY1的比例大致趋势相同为1:1。6、对复合菌MY降解E2的环境因子响应规律进行研究,结果表明,复合菌MY降解E2的氮源优先利用顺序为NH4NO3>Na NO3>NH4Cl,在碳氮比为1:40-1:20时,复合菌MY对E2的降解率较高,在C:N为1:10-1:1时,复合菌MY对E2的降解率下降,结果表明复合菌MY适合在低碳氮比条件下生长。复合菌MY适合在中性碱性环境下生长代谢,最佳p H范围7.56-9.53。Na Cl在培养基中的添加量为1%-4%时,E2降解率在90%以上,Na Cl在培养基中的添加量达到5%时,才产生明显影响,表明复合菌MY具有较强的耐盐能力。在溶解氧实验中,复合菌MY对E2的降解率随着空气体积分数的增加而增加,当空气体积分数为80%时,复合菌MY对E2的降解率达到最高为97.11%,当空气体积分数为90%时,复合菌MY对E2的降解率基本保持不变,表明溶解氧对复合菌MY降解E2有明显影响。在碳源共存实验中,实验结果显示,将E2与乙酸钠、葡萄糖、柠檬酸分别共存时,E2的降解率达到99%以上,表明在环境中添加乙酸钠、葡萄糖、柠檬酸对复合菌降解E2有促进作用。在添加不同重金属离子对复合菌生长的影响实验中,实验结果显示,在Cu2+添加浓度为1.6mg/L时,会抑制复合菌MY的生长,而当Ni2+Cd2+添加浓度为2.0mg/L时,会抑制复合菌MY的生长,当Pb2+的添加浓度达到15mg/L时,复合菌MY生长不受抑制,表明Pb2+对于复合菌MY的生长没有较大影响,复合菌MY对Cu2+Ni2+Cd2+三种离子较为敏感,但在60h之后,复合菌MY可以适应环境继续很好生长。综上所述,复合菌MY具有快速降解E2的能力,对于Na Cl的添加量以及重金属的添加都有较强的耐受性,因此,复合菌MY的降解作为去除环境中雌激素的一种生物法具有更广阔的应用潜质与实际的应用价值。