目的以《伤寒论》为蓝本,对其中甘草相关方剂进行数据挖掘,探讨甘草的配伍规律并筛选出若干代表方剂,对代表方剂开展免疫药理学实验,研究甘草“调和诸药”与其免疫调节作用的相关性,以期揭示甘草“调和诸药”的科学内涵。方法1.《伤寒论》中甘草的配伍规律频数统计、聚类分析、关联分析法研究甘草的配伍规律。2.芍药甘草汤、黄芩汤、四逆散及其拆方对溃疡性结肠炎小鼠的药效学研究(1)葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)自由饮建立溃疡性结肠炎小鼠模型。(2)对各组小鼠进行疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分,治疗结束后测定结肠长度和脾脏指数。(3)HE染色法观察各组小鼠结肠病理变化。(4)ELISA法检测各组小鼠结肠组织TNF-α、IL-1β含量。3.芍药甘草汤、黄芩汤、四逆散及其拆方对溃疡性结肠炎小鼠Th17/Treg平衡的影响(1)ELISA法检测各组小鼠血清IL-6、IL-17、IL-10、TGF-β含量。(2)流式细胞术检测各组小鼠脾脏Th17、Treg细胞比例。(3)Western Blot法检测各组小鼠结肠组织维甲酸相关孤儿受体γt(retinoid-related orphan nuclear receptorγt,RORγt)、叉状头/翅膀状螺旋转录因子3(forkhead box protein 3,Foxp3)蛋白表达。结果1.《伤寒论》中甘草的配伍规律药物频数分析显示,与甘草配伍较多的药物分别是桂枝37次、大枣36次、生姜32次和芍药25次;与甘草配伍较多的药物类别是补虚药和解表药,使用频次均为96次,频率均为31.37%;与甘草配伍较多的是味甘性寒的药物,其中甘味药32次,占36.78%,寒性药物25次,占48.08%。聚类分析结果显示,甘草与桂枝、大枣、生姜、芍药聚为一类。关联分析结果显示,甘草与桂枝、大枣、生姜、芍药关联时支持度较高,分别为52.11%、50.70%、45.07%、35.21%。2.芍药甘草汤、黄芩汤、四逆散及其拆方对溃疡性结肠炎小鼠的药效学研究(1)芍药甘草汤、黄芩汤、四逆散及其拆方组均能降低DAI,增加结肠长度,恢复脾脏指数,但全方组的疗效更好。(2)HE染色结果显示,芍药甘草汤、黄芩汤、四逆散及其拆方组均能改善溃疡性结肠炎小鼠的结肠病理损伤,但全方组治疗效果更佳。(3)ELISA结果显示,芍药甘草汤、黄芩汤、四逆散及其拆方组均能下调溃疡性结肠炎小鼠结肠TNF-α、IL-1β的含量,但全方组的这些参数更低。3.芍药甘草汤、黄芩汤、四逆散及其拆方对溃疡性结肠炎小鼠Th17/Treg平衡的影响(1)ELISA结果显示,芍药甘草汤、黄芩汤、四逆散及其拆方组均能使溃疡性结肠炎小鼠血清IL-6、IL-17的含量降低,IL-10、TGF-β含量升高,但三个全方除去甘草后对IL-6、IL-17含量降低及IL-10、TGF-β含量升高的程度不如各全方组。(2)流式细胞术结果显示,芍药甘草汤、黄芩汤、四逆散及其拆方组均能使溃疡性结肠炎小鼠Th17细胞比例降低,Treg细胞比例升高,但全方除去甘草组调节效果不如全方组。(3)Western Blot法结果显示,芍药甘草汤、黄芩汤、四逆散及其拆方组均能使溃疡性结肠炎小鼠RORγt表达降低、Foxp3表达升高,但全方除去甘草组的效果不如全方组。结论《伤寒论》中甘草、芍药是张仲景最常配伍的药对之一。芍药甘草汤、黄芩汤、四逆散对溃疡性结肠炎均有治疗作用,其治疗作用可能与调节Th17/Treg的免疫平衡有关,而芍药甘草汤、黄芩汤、四逆散各方分别除去甘草后的效果大大降低,说明甘草可能通过对免疫系统的影响而表现为对相关疾病的非选择性作用,这种非选择性作用可以理解为甘草“调和诸药”的作用。