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蒺藜Tribulus terrestris L.为蒺藜科蒺藜属一年生草本植物,又名白蒺藜、屈人、刺蒺藜、硬蒺藜、蒺骨子,因果实中化学成含量较丰富,多以干燥成熟果实供药用。蒺藜植物本身适应性较好,分布范围较广,全国均有,长江以北半湿润半干旱地区较为集中,多生于砂质土地、荒坡、山地等地方,特别能适应旱生环境条件。当年秋季采摘果实,晒干后除去杂质后炮制入药,现已经因生产和使用需要,许多地方开展了蒺藜无公害规范化种植技术研究。蒺藜植物因其根系可以向范围宽旷地区伸展,具有较强的抗旱能力,可以在干旱沙地等起到一定的防风固沙的功能,因此蒺藜也可用于砂质土地恢复。本研究在已有无菌苗基础之上,选取蒺藜植物的茎段、叶片为外植体,观察选取最佳外植体进行蒺藜愈伤组织筛选,调节各个营养物质之间的浓度高低,确定茎段最佳外植体,并且筛选出在25℃条件下无菌蒺藜茎段最佳固体愈伤组织培养基:MS+6-BA 0.1 mg/L+2,4-D 0.5mg/L+ZT 0.5 mg/L。得到颜色鲜亮,有光泽,质地疏松,生长状态良好的细胞系。通过选取良好的细胞,保留备用,进行液体悬浮培养。在此基础之上,准备进行液体悬浮培养,首先进行蒺藜细胞液体悬浮培养激素浓度单一因素的调节和比较,选取生长量作为观察指标。得到6-BA、2,4-D、ZT最佳浓度分别是0.3 mg/L、0.5 mg/L、0.5 mg/L。以此条件下,将三种激素组合,确定愈伤组织细胞液体悬浮最适宜培养基:MS+6-BA 0.1 mg/L+2,4-D 0.3 mg/L+ZT 0.5mg/L。在确定主要培养基后,在适宜的环境条件及因素下蒺藜细胞愈伤组织才能正常生长,本研究以蒺藜细胞增长倍数做为观测指标,筛选接种量、培养基、转速、pH值、碳源浓度、光照周期进行优化。蒺藜细胞液体悬浮培养适宜条件为25~30 g/L接种量、MS培养基、转速120 r/min、pH为6.5、蔗糖浓度30 mg/L、1/2光培养条件下培养30d得到最佳悬浮细胞,并对蒺藜植物种子、植物、固体愈伤组织、液体悬浮培养细胞中的黄酮醇成分检测,成分含量分别为1.91%、1.54%、0.56%、0.61%。为了进一步提高细胞中黄酮醇成分含量,加入诱导子苯丙氨酸、酪氨酸、肉桂酸,进行细胞培养,最佳浓度组合为MS+6-BA 0.1 mg/L+2,4-D 0.3 mg/L+ZT 0.5mg/L+9.39 mg/L苯丙氨酸+9.56 mg/L酪氨酸+10.94 mg/L肉桂酸,检测化学成分,黄酮醇含量有所增加为0.78%,本研究建立蒺藜细胞液体悬浮培养体系并提高黄酮醇含量。