龋病是在人类中广泛传播的疾病之一。在我国进行的一项调查表明,被调查的五岁儿童中,有四分之三的儿童患有龋病。变形链球菌是一种革兰氏阳性细菌,目前已被确认为与龋病的发生有紧密的关系,它具有的一些毒力因子可以使它自身聚集在牙齿生物膜中,产酸并耐酸,从而导致牙齿损坏。因此,抑制变形链球菌的生长,阻止牙齿表面菌团的形成对龋病的防治是至关重要的。使用氟化物、无糖产品和密封剂、抗菌剂以及其他牙齿保护措施是一些有效的可影响龋病在年轻人群中发生的方法。但是,其中一些方法由于药物的抗性和副作用,在使用中受到限制。研发人员仍在继续寻找可以减少龋病加重和流行的产品。溶菌酶是在脊椎动物和无脊椎动物中广泛存在的、可用作杀菌剂的一种蛋白质,它能够催化水解革兰氏阳性细菌细胞壁中重要成分肽聚糖上N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖之间的β-1, 4糖苷键,导致细菌细胞壁的裂解。鸡蛋溶菌酶得到了很好的研究,并在许多方面受到利用。本课题组将一个编码溶菌酶的基因从柞蚕中分离出来,柞蚕溶菌酶成熟肽含有120个氨基酸,其预测的分子量为13, 986道尔顿,与鸡蛋溶菌酶相比缺少9个氨基酸,二者氨基酸序列的同源性不足40%。柞蚕溶菌酶中含有一个可能的糖基化位点Asn31-Glu32- Ser33,这是鸡蛋溶菌酶所不具备的。这些差异暗示这两种溶菌酶在结构和功能上可能有一定区别。但关于柞蚕溶菌酶,尚未建立有效的表达系统,对其酶学作用机制和结构也知之甚少。本研究的目的是:(1)建立柞蚕溶菌酶的毕赤酵母表达系统;(2)筛选柞蚕溶菌酶酵母表达菌株;(3)纯化表达的柞蚕溶菌酶;(4)分析重组柞蚕溶菌酶糖基化性质;(5)确定重组柞蚕溶菌酶N端氨基酸序列;(6)