论文部分内容阅读
目的：观察二十碳五烯酸(EPA)和卡铂联合应用对人肺癌A-549细胞株的抗增殖和诱导凋亡作用,以观察EPA本身及联合应用的抗癌作用,并对其作用机制进行探讨,为临床减少卡铂用药剂量从而减少毒副反应提供实验依据。方法：应用噻唑蓝(MTT)比色实验测定二十碳五烯酸及二十碳五烯酸联合卡铂对人肺癌A-549细胞株的抗增殖作用。通过倒置显微镜和HE染色观察肺癌A-549细胞凋亡的形态学变化,并应用流式细胞术对肺癌A-549细胞凋亡进行定量分析。应用酶标仪检测肺癌A-549细胞的ROS水平,免疫细胞化学染色法观察bcl-2的表达。结果：①MTT比色实验结果表明,二十碳五烯酸有抗肿瘤细胞增殖作用,并呈剂量依赖性。并且EPA联合卡铂明显比卡铂单独使用时对肺癌A-549细胞的抑制率要高。②通过倒置显微镜和HE染色进行形态学观察,可以观察到卡铂组、EPA组和联合组均可见贴壁肿瘤细胞数量较对照组明显减少,部分表现为体积缩小、变圆,连接消失,与周围细胞发生脱离,失去肺癌细胞原有多角形或梭形形态,贴壁不牢,核浓缩,细胞核染色质高度凝聚、边缘化,呈深蓝色,符合凋亡形态学改变。③流式细胞仪检测结果发现EPA联合卡铂组的凋亡率较单用卡铂组明显增加。④通过检测肺癌细胞内ROS水平可观察到用药48h后,卡铂组与对照组细胞内ROS水平变化无显著性差异,而EPA组和联合组则明显提高细胞内ROS水平。⑤观察免疫细胞化学染色的结果,可以发现联合组抗凋亡因子bcl-2的表达较对照组、EPA组和卡铂组明显减弱。结论：①二十碳五烯酸(EPA)对人肺癌A-549细胞有抗增殖作用,并呈剂量依赖性。②二十碳五烯酸可明显增强卡铂的抗肿瘤增殖作用。③二十碳五烯酸与卡铂联合应用比单用卡铂的肺癌细胞凋亡率明显增加。④二十碳五烯酸联合卡铂可使肺癌A-549细胞内ROS水平明显提升。⑤二十碳五烯酸联合卡铂可使肺癌A-549细胞内抗凋亡因子bcl-2的表达减弱。