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目的:肝细胞癌(HCC)是一种威胁人类生命的恶性肿瘤,其发病机制尚未确定。对于原发性肝癌的分子机制研究目前是国内外的一个研究热点,许多micro RNA(mi RNA)已被证明在肝癌发生发展中扮演着重要的角色。我们选取了mi R-95这一micro RNA,而且已有许多研究表明,mi R-95可以促进许多肿瘤生长,如结肠癌、肝癌、乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌和非小细胞肺癌等。本课题在已有研究的基础上着重研究MicroRNA 95在HCC发生以及发展中的作用。方法:miRNA高通量测序技术及qRT-PCR检测mi R-95在肝癌组织及正常肝组织中的表达;CCK8以及克隆形成实验研究mi R-95及ST7L在体外对HCC增殖的影响;划痕实验以及Transwell实验研究mi R-95及ST7L在体外对HCC迁移的影响;裸鼠成瘤实验及裸鼠肝癌肺转移实验研究mi R-95及ST7L在动物体内对HCC增殖及迁移的影响;q RT-PCR实验研究mi R-95/ST7L/Akt/GSK3β/β-catenin信号轴下游相关基因m RNA水平的变化;western-blot实验研究mi R-95/ST7L/Akt/GSK3β/β-catenin信号轴相关蛋白及其下游相关蛋白水平的改变;免疫荧光实验对ST7L及AKT蛋白进行细胞共定位;免疫组化实验检测HCC组织及裸鼠肝癌组织相关蛋白的水平;双荧光素酶报告基因实验研究mi R-95对ST7L基因表达的调控;CO-IP实验研究ST7L与AKT的相互作用;运用SPSS对mi R-95的表达水平与HCC各临床病理因素的关系进行统计学分析。结果:组织学实验结果显示mi R-95在肝癌组织的表达显著高于正常肝组织,且mi R-95的表达水平与肝癌的肿瘤大小及肿瘤数目密切相关;CCK8和克隆形成实验结果提示mi R-95在体外能够促进HCC的增殖;划痕实验以及Transwell实验结果显示mi R-95在体外能够促进HCC迁移;在动物体内裸鼠成瘤实验及裸鼠肝癌肺转移实验研究mi R-95能够促进HCC增殖及迁移;双荧光素酶报告基因实验显示ST7L是mi R-95的直接作用靶点;免疫组化的结果提示HCC组织中ST7L蛋白的表达水平与mi R-95的表达水平呈明显负相关;回复实验结果显示ST7L在体外及体内能够逆转mi R-95引起的HCC增殖;机制研究的结果显示mi R-95可以通过其靶点ST7L调节Akt/GSK3β/β-catenin信号通路,并引起Akt/GSK3β/β-catenin信号轴相关蛋白及其下游相关基因的m RNA及蛋白水平的改变;免疫荧光实验发现ST7L及AKT蛋白有相同的细胞定位;CO-IP实验结果显示ST7L能够与AKT羧基末端相互作用抑制Akt(Ser473)的磷酸化。结论:研究表明,在人体HCC组织中,mi R-95在肝癌组织的表达显著高于正常肝组织,且mi R-95的表达水平与肝癌的肿瘤大小及肿瘤数目密切相关;生物学功能研究表明在体外及动物体内mi R-95可以促进HCC的增殖及迁移;机制研究表明,ST7L能够与AKT羧基末端相互作用从而抑制Akt(Ser473)的磷酸化,mi R-95可以通过其直接作用靶点ST7L调控Akt/GSK3β/β-catenin信号轴可以在体内及体外促进HCC的增殖及迁移。