本论文以三种主要的有害重金属汞、铬、铅为研究对象,制备出相应的单克隆抗体,以此为基础,建立了间接竞争酶联免疫检测法（ic-ELISA）,并开发了胶体金免疫层析试纸条。本研究以6-巯基烟酸连接甲基汞与载体蛋白,以1-（4-异硫氰苄基）乙二胺四乙酸作为双功能螯合剂,连接重金属离子(Cr3+、Pb²⁺)与载体蛋白,制备出完全抗原,经紫外扫描和电泳鉴定,抗原合成成功。通过小鼠免疫、细胞融合和抗体纯化,获得相应的单克隆抗体,编号分别为2F8、1G8和1G1,并鉴定其特性。其中抗体2F8识别的是甲基汞和Hg²⁺,而不是与螯合剂反应生成的复合物。2F8、1G8和1G1的亚型分别是IgG2b、IgG1和IgG2a,都是高亲和力、高特异性抗体。以三种抗体为基础,在最优条件下建立了间接ELISA法。甲基汞、Hg²⁺、Cr3+-EDTA、Pb²⁺-ITCBE的半数抑制率（IC50）分别为16.64 ng/mL、1.52 ng/mL、14.60 ng/mL、1.99 ng/mL。最低检测限分别为5.27 ng/mL、0.354 ng/mL、3.89 ng/mL、0.632 ng/mL。随后,将建立的ic-ELISA方法用于实际样品的检测。选择湖水为实际样品,进行了甲基汞和Hg²⁺的添加回收实验,回收率为97.8%-107.5%。选择血清为实际样品,进行了Cr3+的添加回收实验,回收率为83.5%-90.65%。选择牛奶为实际样品,进行了Pb²⁺的添加回收实验,回收率为86.75%-89.5%。基于三种抗体建立了相应的免疫层析试纸条方法,并用于实际样本的检测。甲基汞在湖水中的消线值为500 ng/mL,肉眼可视最低检测限为50 ng/mL。Cr3+在血清中的消线值为500 ng/mL,检测限为100 ng/mL。Pb²⁺在牛奶和血清中的消线值为100 ng/mL,检测限20 ng/mL,在尿样中的消线值为50 ng/mL,检测限10 ng/mL,满足现场快速检测的需求。