非洲菊的离体快繁及在离体条件下诱导多倍体的研究

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非洲菊为世界著名切花,花大、色艳、切花率高、水养期长,兼具色、形、韵之美,观赏价值极高,值得广泛种植。非洲菊传统的繁殖方法成本高、效率低、品种易退化,不能满足快速增长的市场需求。通过组织培养方法可以快速获得大量的再生植株,缩短繁殖周期,增加繁殖系数,并有利于避免传统的分株繁殖与种子繁殖带来的品种退化问题。现在国内的非洲菊优良品种均是通过从国外高价购进种子或种苗来获得,因此有必要利用各种育种方法培育我国自己的优良品种。本项目研究的目的就是针对非洲菊的繁殖与育种两方面的问题,研究非洲菊的组培技术及在离体条件下用化学方法诱导非洲菊的多倍体植株,为非洲菊的快速繁殖、优良品种的培育和快速推广提供物质与技术支持;对保持非洲菊的优良种质资源与优良性状的稳定、提高非洲菊的观赏价值、降低生产成本、促进其商业化生产意义重大。 用非洲菊南燕杂交F1代种子无菌萌发的种子苗作外植体,在附加不同浓度和比例的生长素及细胞分裂素的不同基本培养基上,进行丛生芽的诱导、芽的继代增殖、芽苗生根与移栽,以获得再生植株。结果表明:最佳发芽培养基和培养条件分别为1/2MS液体培养基和在900 lx光照下发芽;种子苗诱导丛生芽的培养基以MS+BA1.5mg.L-1+IBA0.2 mg.L-1较好,诱导系数达到7;芽宜在1/2MS+BA0.5 mg.L-1+NAA0.1 mg.L-1中增殖,增殖系数高达10,且增殖芽生长好;增殖后的单芽置于1/2MS+IBA0.2 mg.L-1中生根,生根率达100%,平均生根数量多,幼苗生长势旺;将生根苗移入液体基质中栽培,成活率最高,达100%。从F1种子萌发到再生植株移栽成活,中间经过2次继代,仅4个月,繁殖系数高达700倍,同时本实验中均以液体培养非洲菊,不仅生长速度快,还节约了生产成本的80%,因而真正达到了快速繁殖,降低生产成本的目的。而作为对照实验的花托培养,最初愈伤组织启动较快,在1/2MS+BA8 mg.L-1+NAA0.5-0.7mg.L-1中培养愈伤组织生长好,但培养2个月,仅极少量的芽分化。 在非洲菊的种子苗诱导出丛生芽和部分愈伤组织之后,分别用浓度为0.01%、0.05%、0.1%、0.2%的无菌秋水仙碱溶液浸泡植株基部12h,处理完后进行芽的继代增殖与生根,40d后进行形态学与细胞学观察。结果表明:在非洲菊芽增殖之前用0.05%的秋水仙碱溶液处理12h诱变效果最好,可获得38.46%的诱变率,并成功地诱导出多倍体植株及部分嵌合体。变异植株表现出叶大而厚、叶多、花叶、根粗等外部形态,多倍体植株表皮气孔面积增大一倍以上,单位面积的气孔数量明显减少,染色体数目加倍,核仁增大,核仁数量增多。
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