心脏型脂肪酸结合蛋白死后诊断急性心肌梗死的实验研究

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目的 观察正常大鼠、心肌梗死大鼠死后不同时间段心肌细胞胞浆内、心血和股静脉血(外周血)中心脏型脂肪酸结合蛋白(Heart-type fatty acid binding-protein, H-FABP)在死后不同时间段的含量变化,研究自溶对H-FABP含量的影响,为H-FABP应用于死后诊断心肌梗死性猝死提供依据。 方法 按Selye法结扎大鼠左冠状动脉前降支复制急性心肌梗死的动物模型,66只SD大鼠(重200~300克,雌雄不限)随机分为11组。其中,假实验组1组(D组),开胸不结扎术后4h处死,死后0h、6h、12h、24h、48h心脏取材,抽取心脏及股静脉血;对照组5组(A1、A2、A3、A4、A5),分别为正常大鼠死后0h、6h、12h、24h、48h心脏取材,抽取心脏及股静脉血。实验组(心肌梗死组)5组(B1、B2、B3、B4、B5),冠状动脉结扎后4h处死,分别于死后0h、6h、12h、24h、48h心脏取材,抽取心脏及股静脉血。用免疫组织化学染色法,观察心肌梗死大鼠死后不同时间段H-FABP在心肌细胞中脱失的情况;用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法,测定心肌梗死大鼠死后不同时间段H-FABP在心血及外周血中含量的变化。 结果 1、免疫组织化学染色:(1) 正常对照组0h组,心肌细胞胞浆全部染成均匀的棕黄色,用苏木素衬染后,细胞核染成淡蓝色,心肌细胞间质及其他细胞成分不着色;随者死亡时间的延长,组织发生弥漫性自溶,至48h,细胞界线不清、横纹消失,细胞核碎裂、溶解、消失,镜下一片黄染。 (2) 实验组0h组,心肌细胞胞浆内脂肪酸结合蛋白出现脱失,且脱失区弥漫心肌全层,与对照组0h组相比,镜下有明显的差异;随着时间的延长,自溶过程开始发生,逐渐出现心肌细胞胞膜不完整,细胞界线不清,细胞核碎裂、溶解;放置48h后,心肌细胞镜下呈现均匀一致的棕黄色,无法区分缺染区和正常染色区:与对照组相比,差异无显著性。 2、ELISA:(1) 实验组和对照组心血H-FABP浓度均显著高于外周血,四条曲线均呈上升趋势。(2) 实验组和对照组外周血H-FABP浓度比较:在死亡当时(0h),实验组外周血H-FABP浓度为462.71+214.44μg/l,显著高于对照组的浓度值
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