补肾通络方对rIL-1β诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及TGF-β1、CTGF表达的影响

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目的:观察补肾通络方(bushentongluofang. BSTLF)对大鼠白介素-1β (rIL-1β)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)异常增殖及转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF) mRNA表达的影响,进而探讨其阻抑肾纤维化,保护肾脏的可能机制。方法:1、应用血浆药理学方法,制备福辛普利(Fosinopril, FOS)和BSTLF不同剂量含药血浆;2、培养大鼠肾小球系膜细胞,采用rIL-1β作为刺激因子,构建细胞异常增殖模型;3、将大鼠肾小球系膜细胞分为6组:(1)空白对照组;(2)rIL-1β干预组(模型组);(3)FOS组(阳性药物对照组);(4)BSTLF高剂量组;(5)BSTLF中剂量组;(6)BSTLF低剂量组。4、MTT法:检测BSTLF含药血浆对大鼠肾小球系膜细胞增殖情况的影响。5、RT-PCR法:检测不同血浆作用大鼠肾小球系膜细胞24h后TGF-β1、CTGF mRNA的表达。结果:1、各组细胞增殖结果:与空白对照组比较,rIL-1β能明显刺激体外培养的GMCs增殖(P<0.01);与rIL-1β组比较,FOS组和BSTLF高、中、低剂量组均能抑制GMCs增殖(P<0.05或P<0.01);与FOS组比较,BSTLF高、中、低剂量各组间没有统计学差异(P>0.05)。2、各组细胞CTGF、TGF-β1的mRNA表达的比较:与空白对照组比较,rIL-1β能明显刺激GMCs CTGF、TGF-1mRNA表达(P<0.01);与rIL-1β组比较,FOS组和BSTLF高、中、低剂量各组能显著降低由rIL-1β介导的GMCs CTGF、TGF-β1mRNA表达(P<0.01);BSTLF高、中、低剂量各组间相互比较没有统计学差异(P>0.05),可能说明这三个剂量超过临床给药量,可适当降低给药剂量,为临床给药提供参考。结论:1、rIL-1β能刺激GMCs异常增殖以及TGF-β1、CTGF mRNA表达;2.BSTLF含药血浆能明显抑制rIL-1β刺激的GMCs的异常增殖;3.BSTLF含药血浆能抑制rIL-1β刺激的GMCs CTGF、TGF-β1mRNA的表达,其作用与FOS作用相似,甚至抑制作用更强,但不成剂量依赖性。实验结论显示BSTLF能抑制炎症导致的促纤维化因子的表达,能延缓肾纤维化的进程,提示该方有利于减缓NS及其衍生疾病的发展。
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