氮、磷及糖浓度对膜荚黄芪不定根毛蕊异黄酮葡萄糖苷积累的影响

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毛蕊异黄酮葡萄糖苷是膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch.)Bunge)中主要的生物活性成分之一,其药理作用颇多,可作为评价黄芪质量的标记化合物。基于黄芪野生资源枯竭的现状,培养不定根成为了提高黄芪有效成分的重要方法之一。本研究旨在优化B5液体培养基,通过改变培养基中主要组成成分氮、磷及糖的浓度,了解它们对毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的积累、过氧化氢(H2O2)含量的变化及相关基因酶CHS、IFS相对表达量的水平。为揭示毛蕊异黄酮葡萄糖苷的生物合成机制和进一步规模化生产提供理论依据。结果表明:培养基中氮、磷及糖的浓度配比分别为3 mmol·L-1(NH4+:NO3-比为0:3)、2.5 mmol·L-1和40 g·L-1时毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量达到最大值217.6μg·g-1,符合《中国药典》(2015)规定的标准(200 μg·g-1)。各浓度配比下,中等浓度的H2O2水平最有利于膜荚黄芪不定根毛蕊异黄酮葡萄糖苷的积累,且毛蕊异黄酮葡萄糖苷合成途径中重要基因CHS和IFS的表达量与H2O2的水平一致。利用生物反应器放大培养时,优化后的氮、磷及糖浓度配比培养的黄芪不定根毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量达到了 2年生栽培黄芪水平。
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