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目的:
通过检测凋膜止崩方直接作用于大鼠增生型子宫内膜组织后Bcl-2(B 淋巴瘤/白血病-2,B cell lymp homa/leukemia-2)及Bax(Bcl-2 associated Xprotein)mRNA的表达,探讨凋膜止崩方对增生型子宫内膜的祛除作用,即凋膜止崩方治疗子宫内膜增生症的作用机制,为应用中药新方法治疗无排卵性功血提供理论基础及科学依据。
方法:
将38只大鼠随机分为4组:A空白对照组(n=8)、B模型对照组(n=10)、C小剂量组(n=10)、D大剂量组(n=10),除A组外,其他3组将建立增生型子宫内膜大鼠模型。空白对照组(A)仅行开关腹术,其他3组大鼠行卵巢去势术。术后第3天开始造模,A组肌注助溶剂植物油(高压灭菌花生油,0.3ml/200g),隔天注射,通过阴道涂片观察大鼠动情期,于阴道涂片示处于动情前期时处死;B、C、D组均肌注苯甲酸雌二醇(用高压灭菌花生油稀释至0.1mg/ml,注射剂量0.15ml/100g),隔天注射,共注射14次。注射完成后,每组随机选两只大鼠取子宫组织进行HE染色,证实为增生型子宫内膜。待病理证实造模成功后,行宫腔注药术,将配置好的凋膜止崩液注入C、D组模型大鼠宫腔内(C组药物浓度为0.0005g/ml,D组为0.001g/ml),同时B组大鼠宫腔注入生理盐水,宫腔注药后3天处死并取大鼠子宫组织。通过RT-PCR(逆转录聚合酶链反应)检测各组大鼠子宫组织中Bcl-2、BaXmRNA的表达并进行半定量分析。
结果:
1、Bcl-2mRNA的表达:与空白组比较,模型组Bcl-2mRNA表达升高,有显著差异(P<0.05)。与模型组比较,大、小剂量组Bcl-2mRNA的表达有不同程度的降低,大、小剂量组均有统计学意义(P<0.05);小剂量组与大剂量组之间比较无显著差异(P>0.05)。
2、BaXmRNA的表达:与空白组相比,模型组BaXmRNA的表达有所降低,具有显著性差异(P<0.05);与模型相比,小剂量组BaXmRNA的表达显著升高,具有极显著差异(P<0.01),大剂量组BaXmRNA的表达亦升高(P<0.05);小剂量组与大剂量组之间比较无统计学意义(P>0.05)。
结论:
1、与空白对照组相比,模型对照组Bcl-2mRNA的表达上调,BaXmRNA的表达下调,表明Bcl-2及Bax可能参与子宫内膜增生过程。
2、凋膜止崩方祛除子宫内膜增生模型大鼠子宫内膜的主要机制可能是下调Bcl-2mRNA的表达,上调BaXmRNA的表达,使Bcl-2/Bax比值下降,促使细胞凋亡的发生,从而使子宫内膜脱落,达到治疗ADUB的目的。