目的:1.通过摸索适宜浓度的棕榈酸钠联合高糖培养HAEC,来模拟糖尿病患者高糖高脂的内环境,以建立高糖高脂诱导的HAEC细胞损伤模型。2.观察白杨素对高糖高脂诱导的HAEC细胞损伤的保护作用及机制。方法:1.首先使用不同浓度的棕榈酸钠(0.1-0.4mmol·L^-1)加高糖(30mmol·L^-1),孵育人主动脉内皮细胞24h,通过MTT法检测HAEC细胞存活率,选取合适的棕榈酸钠浓度。然后以不同浓度白杨素(1、10、20μmol·L^-1)孵育4h,判断白杨素对HAEC的细胞毒性。分别以不同剂量的白杨素CHR-L(1μmol·L^-1)、CHR-H(10μmol·L^-1)预处理HAEC细胞4h,再用上一结果中选出的适宜浓度的高糖高脂(30mmol·L^-1HG+0.1mmol·L^-1SPA)孵育24h诱导HAEC细胞损伤,观察白杨素对HAEC的保护作用。2.将HAEC细胞分为CON组、HG+SPA组、CHR-L(1μmol·L^-1)组、CHR-H(10μmol·L^-1)组,检测HAEC细胞的乳酸脱氢酶释放率、培养液中的NO浓度、细胞内ROS的生成。通过Western Blot法检测内质网应激相关蛋白GRP78、IRE1α、PERK、ATF6和炎症、粘附相关蛋白的表达。结果:1.高糖浓度均为30mmol·L^-1,HAEC细胞的存活率随着SPA浓度的增高而降低,当SPA浓度为0.1mmol·L^-1时HAEC细胞的存活率为（45.79±5.16）%,选定0.1mmol·L^-1为造模用高脂浓度。由于MTT结果显示预孵20μmol·L^-1的白杨素4h使HAEC的存活率显著下降,后续实验分组即为CHR-L(1μmol·L^-1)组、CHR-H(10μmol·L^-1)组。预孵CHR(1μmol·L^-1和10μmol·L^-1)能明显抑制高糖高脂诱导的HAEC细胞存活率下降,说明CHR对高糖高脂诱导的HAEC细胞损伤有明显的保护作用。2.高糖高脂孵育使HAEC细胞乳酸脱氢酶释放增多、NO释放减少,细胞内ROS生成增加,内质网应激标志蛋白GRP78、IRE1α、ATF6和PERK,TXNIP/NLRP3,及粘附分子ICAM-1的表达显著上调。预孵白杨素(1μmol·L^-1和10μmol·L^-1)可以使HAEC细胞乳酸脱氢酶释放减少、NO释放增多、细胞内ROS生成减少,使内质网应激相关蛋白和TXNIP/NLRP3,ICAM-1的表达均显著下调。结论:高糖高脂(30mmol·L^-1 GLU+0.1mmol·L^-1 SPA)能够造成HAEC细胞损伤,白杨素(1μmol·L^-1和10μmol·L^-1)预孵4h减轻了高糖高脂诱导的HAEC细胞损伤,提高细胞存活率,减少LDH的释放,增加NO的释放,减少黏附分子表达。白杨素通过抑制内质网应激,减少ROS生成,进而下调氧化应激引起的TXNIP/NLRP3的表达来发挥其保护作用。