雄激素对体外培养人黄素化颗粒细胞PTEN表达的影响

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目的研究不同浓度雄激素对体外培养的人黄素化颗粒细胞中PTEN表达的影响,探讨雄激素引起颗粒细胞凋亡的可能机制,为多囊卵巢综合征的发病机制提供新的研究思路。方法收集2011年11月-12月中南大学湘雅医院妇产科生殖中心经体外受精-胚胎移植(IVF-ET)或卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)治疗的患者卵巢黄素化颗粒细胞,体外培养48小时后分别加入不含血清的的不同浓度的睾酮培养基分成四组,空白对照组、10-7M组,10-6M组,10-5M组,继续培养24小时,用RT-PCR法检测颗粒细胞中PTEN mRNA的表达,DAPI染色法检测颗粒细胞凋亡情况。结果1、人黄素化颗粒细胞体外培养24小时后贴壁生长,48小时后细胞增殖显著,胞浆内含丰富的颗粒状物质,胞浆饱满,张力明显,细胞伸出细长伪足,细胞与细胞之间通过伪足紧密连接,呈典型颗粒细胞样特征,适宜行体外实验。2、体外培养人黄素化颗粒细胞中添加10-5M浓度的睾酮培养24小时后能促进颗粒细胞中PTEN的mRNA的表达,与10-7M组、10-6M组及空白对照组比较差异均有显著性(P<0.05),10-7M组与10-6M组与空白对照组比较差异均无显著性(P>0.05);3、体外培养人黄素化颗粒细胞中添加10-5M浓度睾酮培养24小时后检查发现颗粒细胞凋亡指数为6.29±1.78%,与10-7M组、10-6M组及空白对照组比较差异均有显著性(P<0.05),10-7M组与10-6M组与空白对照组比较差异均无显著性(P0.05);结论1、PTEN在人黄素化颗粒细胞中有表达,高浓度睾酮(10-5M)促进颗粒细胞凋亡。2、高浓度睾酮(10-5M)能提高颗粒细胞中PTEN的mRNA水平,其诱导颗粒细胞凋亡的机制可能与PTEN介导的凋亡通路有关。
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