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目的:观察韩氏针刺对海洛因依赖大鼠学习记忆及海马突触素(synapsin,SYP)和胆碱乙酰基转移酶(cholineacetyltransferase,ChAT)表达的影响,初步探讨其作用机制。
方法:①75只SD(Sprague-Dawley)大鼠,随机分为实验组和对照组,实验组再分为实验1组(非针刺组)和实验2组(针刺组)。实验组按给药剂量逐日递增的原则皮下注射海洛因9天,建立成瘾模型,对照组以同样方式注射等量的生理盐水。②Morris水迷宫测定实验组和对照组大鼠空间辨别学习记忆的能力,之后对照组和实验1组,光化学法检测海马组织中一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)、乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)的活性;石蜡切片HE染色光镜下观察海马神经元形态及数量的变化;免疫组化法检测海马内SYP和ChAT的蛋白表达,并通过图象处理软件进行半定量分析。③实验2组通过韩氏针刺进行戒断治疗,针刺“足三里”(胫骨前结节外侧2mm)和“三阴交”(胫骨后内踝上部2mm)[1],连续治疗5天后再重复②的实验。
结果:①实验组大鼠的戒断症状评分符合海洛因依赖大鼠模型评分指标,并且实验组和对照组大鼠的戒断评分和体重变化均有显著性差异(P<0.01)。②与对照组相比,实验组大鼠在定位航行实验中的逃避潜伏期及搜索距离明显延长(P<0.05),空间探索实验中原安全岛所在象限的搜索时间及原安全岛所在象限的游泳距离占总距离的百分比明显缩短(P<0.05),海马内AchE(P<0.05)、NOS(P<0.05)活性增高,而SYP(P<0.05)、ChAT(P<0.05)表达减弱.③与实验组相比,针刺后实验2组在定位航行实验中的逃避潜伏期及搜索距离明显缩短(P<0.05),空间探索实验中原安全岛所在象限的搜索时间及原安全岛所在象限游泳距离占总距离的百分比增加(P<0.05)。④与实验1组相比,实验2组皮质和海马神经元的变性数量减少;海马内AchE(P<0.05)、NOS(P<0.05)的活性降低;同时海马内SYP(P<0.05)和ChAT(P<0.05)的表达增强。⑤实验2组针刺前、后比较:针刺后定位航行实验中的逃避潜伏期及搜索距离明显缩短(P<0.05),空间探索实验中原安全岛所在象限的搜索时间及原安全岛所在象限游泳距离占总距离的百分比增加(P<0.05)。
结论:1、海洛因依赖会导致SD大鼠学习记忆能力减退。
2、海洛因依赖引起海马组织中记忆相关蛋白SYP和ChAT表达下降,同时增加海马内NOS和AchE活性。
3、韩氏针刺戒断治疗对海洛因依赖引起的大鼠学习记忆的减退有一定恢复作用,同时增强海马内SYP和ChAT的表达,降低海马内NOS和AchE活性。