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黄粉虫幼虫蛋白质含量丰富,是制备昆虫生物活性肽的有效资源之一。本研究以黄粉虫幼虫为材料,从黄粉虫幼虫中分离出4种蛋白,对获得的黄粉虫水溶蛋白和碱溶蛋白,分别进行了双酶水解工艺条件优化,并比较了两种多肽的抗氧化活性等。本研究为黄粉虫蛋白的充分利用提供了依据,提高黄粉虫的经济价值。主要结果如下:(1)黄粉虫幼虫脱脂干粉中水溶蛋白、碱溶蛋白、酸溶性蛋白和醇溶性蛋白所占比例分别为42.60%、16.33%、1.65%和1.33%。(2)双酶水解水溶蛋白的最佳工艺条件为:料液比1∶20、水解时间2h、加酶量17.36 mg/g(碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶活比为1∶1)、pH8.0、温度46.5℃。在优化条件下制得的水解液·OH清除率为86.21%。(3)碱溶蛋白双酶水解的最佳工艺条件为:料液比1∶20、水解时间1.9h、加酶量10mg/g(碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶活比为1∶1)、pH7.2、温度47.8℃。在优化条件下制得的水解液·OH清除率为55.38%。(4)通过Sephadex G-25葡聚糖凝胶色谱,水溶蛋白多肽被分离成3个组分,峰S2的·OH清除率高达64.26%;利用DEAE Sepharose F.F.离子交换层析将峰S2分离成4个部分,多肽组分S2-1和S2-2的·OH清除率较高,分别为78.44%、45.39%;碱溶蛋白多肽被Sephadex G-25凝胶过滤色谱分离成4个组分,其中峰J3的·OH清除率达40.55%;利用DEAE Sepharose F.F.将峰J3分离成4个部分,多肽组分J3-2的·OH清除率最强,为47.02%。(5)对分离纯化后的各抗氧化肽进行氨基酸成分测定可知,黄粉虫的水溶蛋白制得的抗氧化肽S2-1中主要的氨基酸为Ala、Pro、Leu、Glu、Val、Gly、Ile、Ser;S2-2中主要的氨基酸为Glu、Asp、Pro;碱溶蛋白制得的抗氧化肽J3-2中主要的氨基酸为Glu、Asp、Pro、Gly。