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目的:研究缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达,测定肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD),探讨三者的相互关系及其与肿瘤生物学特征和肿瘤血管生成的关系。方法:1免疫组织化学方法检测43例甲状腺乳头状癌、20例甲状腺腺瘤和20例甲状腺正常组织中HIF-1α、VEGF蛋白的表达,用CD34标记新生血管,计算微血管密度,并结合甲状腺乳头状癌的临床病理资料进行分析;2蛋白印迹法测定10例甲状腺乳头状癌、10例甲状腺腺瘤和10例甲状腺癌旁正常组织中HIF-1α蛋白表达情况。结果:1 HIF-1α蛋白的表达:HIF-1α蛋白主要表达于肿瘤细胞的胞质,肿瘤组织坏死边缘区域多见,正常甲状腺组织中仅见少量阳性着色。甲状腺乳头状癌组、甲状腺腺瘤组和正常组织组中HIF-1α蛋白阳性表达率分别是67.4%、20.0%和20.0%,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01);乳头状癌组与腺瘤组和正常组织组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01)。2 VEGF蛋白的表达:VEGF蛋白主要表达于肿瘤细胞胞质,某些血管内皮细胞也可见阳性表达,极少数正常腺体上偶见微弱的棕黄色胞浆着色。甲状腺乳头状癌组、甲状腺腺瘤组和正常组织组中VEGF蛋白阳性表达率分别为72.1%(31/43)、25.0%(5/20)和15.0%(3/20),组间比较差异有统计学意义(P＜0.01);乳头状癌组与腺瘤组和正常组织组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01)。3 CD34的表达:CD34在肿瘤和正常组织的间质中均可见表达,定位于血管内皮细胞的胞质,微血管形态不规则,有的新生血管已呈管腔样结构,有的只见内皮细胞呈线状或点状分布。MVD值在甲状腺乳头状癌为114.11±6.23,甲状腺腺瘤为84.47±6.99,正常组织为49.83±6.12,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01),且两两比较差异均有统计学意义(P＜0.01)。4 HIF-1α与PTC临床病理资料的关系HIF-1α蛋白表达与甲状腺乳头状癌患者性别、年龄、肿瘤大小、远处转移无关(P＞0.05),与淋巴结转移和UICC定义的肿瘤分期有关(P＜0.05)。存在淋巴结转移的甲状腺乳头状癌患者HIF-1α蛋白表达率(80.0%)明显高于无转移者(50.0%)(P＜0.05);HIF-1α蛋白表达率随着UICC定义的肿瘤分期的递增而增加(Ⅰ期36.4%,Ⅱ期60.0%,Ⅲ期75.0%,Ⅳ期92.9%)(P＜0.05);并且晚期患者UICCⅢ、Ⅳ期)HIF-1α蛋白表达率(86.4%)高于早期患者(Ⅰ、Ⅱ期)(47.6%)(P＜0.01)。5 VEGF与PTC临床病理资料的关系VEGF蛋白表达与甲状腺乳头状癌患者性别、年龄、肿瘤大小、远处转移无关(P＞0.05),与淋巴结转移和UICC定义的肿瘤分期有关(P＜0.05)。伴有淋巴结转移的PTC中VEGF蛋白表达率(84.0%)明显高于无转移者(55.6%)(P＜0.05);VEGF蛋白表达率随着UICC定义的肿瘤分期的递增而增加(Ⅰ期36.4%,Ⅱ期70.0%,Ⅲ期75.0%,Ⅳ期100.0%)(P＜0.01);其中Ⅳ期VEGF阳性表达率明显高于其他三期(P＜0.01);并且晚期患者(UICCⅢ、Ⅳ期)VEGF蛋白表达率(90.9%)高于早期患者(Ⅰ、Ⅱ期)(52.4%)(P＜0.01)。6甲状腺乳头状癌中HIF-1α和VEGF的表达呈正相关关系(r_s=0.567,P＜0.01);HIF-1α阳性表达组的MVD值(117.59±5.72)高于阴性表达组(109.20±1.98)(P＜0.01);VEGF阳性表达组的MVD值(116.98±5.98)亦高于阴性表达组(109.31±2.21)(P＜0.01);HIF-1α和VEGF共同表达阳性组的MVD值(122.17±4.97)高于共同表达阴性组(108.21±0.98)(P＜0.01),随HIF-1α、VEGF表达强度的增加,MVD值逐渐增大。7蛋白印迹法结果HIF-1α蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达明显高于腺瘤和癌旁正常组织组,各组的相对OD值为:乳头状癌组2.398±0.041;腺瘤组0.869±0.032;癌旁正常组织组0.199±0.027,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01),两两比较差异均有统计学意义(P＜0.01),检测结果与免疫组织化学法结果相符。结论:1甲状腺乳头状癌与甲状腺腺瘤、正常组织相比,HIF-1α和VEGF蛋白表达增多,MVD值升高。提示HIF-1α、VEGF的表达和微血管的增殖与甲状腺乳头状癌的发生、发展紧密相关。2 HIF-1α与VEGF蛋白表达均与甲状腺乳头状癌淋巴结转移和UICC定义的肿瘤分期密切相关,提示二者参与了甲状腺乳头状癌的恶性增殖和侵袭转移,HIF-1α和VEGF对临床判断甲状腺乳头状癌预后有一定价值。3甲状腺乳头状癌中HIF-1α和VEGF蛋白呈正相关关系,并且与MVD值关系紧密,表明HIF-1α在缺氧时可能通过上调VEGF的表达诱导甲状腺乳头状癌微血管的生成,通过此途径为癌细胞生长及浸润转移提供物质基础。