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Heregulin-α是主要由乳腺间质细胞合成和分泌的细胞因子，作用于乳腺导管和腺泡上皮细胞。Heregulin-α对乳腺的发育和泌乳具有一定调控作用，它可以影响妊娠期乳腺导管发育，刺激小鼠乳腺上皮细胞增殖和分化。目前对于乳腺中Heregulin-α及其受体ErbB2和ErbB3的研究仅限于其mRNA水平的表达以及Heregulin-α对培养的乳腺上皮细胞增殖和乳蛋白表达的影响，尚缺乏对乳腺中Heregulin-α及其受体在蛋白质水平上的表达变化规律以及Heregulin-α对乳腺发育、泌乳及退化的作用研究，正常乳腺中Heregulin-α的信号转导途径也不完全清楚。本实验以小鼠为实验材料，采用激光扫描共聚焦显微技术首次对乳腺发育、泌乳及退化各个时期乳腺自身产生的Heregulin-α及其受体ErbB2、ErbB3的表达和定位进行系统研究。结果表明：青春20～40d，乳腺中Heregulin-α基本不表达，青春期45d开始表达，并缓慢逐渐增加；妊娠期，乳腺导管开始延长，分支并进行分化，此时期Heregulin-α水平明显增加，并在妊娠期15d的乳腺中表达达到高峰；泌乳期，Heregulin-α表达显著下降，泌乳期15d为不表达；幼仔离乳后，乳腺上皮细胞凋亡，退化期0～3d，Heregulin-α基本不表达，从退化期6d开始表达量增加，退化期9d时又达到一高峰，退化期12d，Heregulin-α的表达量基本恢复至青春期的表达水平。Heregulin-α主要在乳腺脂肪细胞、导管上皮细胞以及围绕导管的基膜中检测到，在青春期、妊娠期和退化期呈特异性表达。在整个发育周期中，受体ErbB2和ErbB3的表达变化趋势为，青春期20～30d和40～60d，受体ErbB2和ErbB3有微量表达，青春期50d开始缓慢逐渐增加；妊娠期，受体ErbB2和ErbB3明显增加，并在妊娠期15d的乳腺中表达达到高峰；泌乳期，受体ErbB2和ErbB3表达显著下降，泌乳期15d为不表达；退化期0～3d，ErbB2和ErbB3基本不表达，但从退化期6d开始ErbB2和ErbB3表达量增加，并在退化期9d时达到又一高峰，退化期12d时ErbB2和ErbB3的表达基本恢复至青春期表达水平。ErbB2和ErbB3也主要在乳腺脂肪细胞、导管上皮细胞以及围绕导管的基膜中被检测到，在青春期、妊娠期和退化期呈特异性表达。ErbB2和ErbB3的表达变化趋势与Heregulin-α的表达变化趋势相似，呈显著线性正相关，说明乳腺中Heregulin-α是ErbB2和ErbB3专一性的配体，能够专一性诱导ErbB2和ErbB3的生成。ErbB2和ErbB3表达时间的相关性和表达空间的一致性，说明Heregulin-α通过与其受体ErbB2和ErbB3共同作用影响乳腺发育及其生理功能。为阐明乳腺不同发育阶段Heregulin-α及其受体的生物学功能，本实验采用乳腺组织体外培养石蜡切片H．E．染色的方法，研究Heregulin-α对妊娠期、泌乳期和退化期乳腺形态发育的影响。体外培养妊娠中期乳腺组织6d的结果显示：Heregulin-α处理使乳腺导管分支增多，在末端出现腺泡结构，表明妊娠期Heregulin-α可以促进乳腺导管上皮细胞的增殖和分化；体外培养泌乳中期的乳腺组织6d的结果显示：Heregulin-α对乳腺形态变化影响不大；体外培养退化中期乳腺组织6d的结果显示：Heregulin-α处理后乳腺导管消失，仅残留上皮细胞簇样结构，表明Heregulin-α可以促进退化期乳腺退化和重建。本试验采用Western Blot方法对乳腺上皮细胞内β-酪蛋白表达量的检测，结果表明：妊娠期Heregulin-α对β-酪蛋白的表达量影响不大，泌乳期Heregulin-α促进β-酪蛋白的分泌而使乳腺上皮细胞内β-酪蛋白的表达量相对减少；退化期Heregulin-α抑制β-酪蛋白的分泌导致乳腺上皮细胞内β-酪蛋白表达量相对增加。本试验采取乳腺组织体外培养的方法，培养1、2、3、4、5和6d用毛细管电泳检测乳腺组织培养基中β-酪蛋白的分泌含量。结果表明：妊娠期对照组培养基中β-酪蛋白的含量随着培养时间的延长而减少，而Heregulin-α处理组中β-酪蛋白的含量增加且随着培养时间的延长变化不大，说明Heregulin-α在妊娠期具有增加并维持β-酪蛋白分泌的作用；泌乳期对照组β-酪蛋白的含量随着培养时间增加相对缓慢，而处理组中β-酪蛋白的含量随着培养时间的延长而明显增加，说明Heregulin-α在泌乳期能够增加β-酪蛋白的分泌；退化期对照组β-酪蛋白随着培养时间的延长含量下降，Heregulin-α处理组中β-酪蛋白的含量也随着时间的变化而降低，但处理组中β-酪蛋白显著低于对照组，说明Heregulin-α在退化期减少β-酪蛋白的分泌。取Western Blot方法检测Heregulin-α对妊娠期、泌乳期和退化期乳腺中Rab3A表达的影响，结果表明：妊娠期、泌乳期和退化期，Heregulin-α都能够促进Rab3A表达，促进妊娠期乳腺导管上皮细胞的增殖与分化；增强泌乳期β-酪蛋白的表达分泌能力；促进退化期乳腺的退化和组织重建。本试验采用Western blot方法，分别对妊娠期、泌乳期和退化期乳腺Heregulin-α信号转导途径信号分子的磷酸化状态进行检测。结果表明：妊娠期，Heregulin-α能够促进STAT5、p42／D44、p38和PKC的磷酸化，刺激乳腺上皮细胞的增殖和分化，增加并维持β-酪蛋白的表达和分泌；泌乳期，Heregulin-α能够促进STAT5、p38的磷酸化并抑制PKC磷酸化，维持泌乳期乳腺形态，促进乳蛋白的合成和分泌；退化期，Heregulin-α能够促进STAT3磷酸化并抑制PKC的磷酸化，启动乳腺上皮细胞退化，为乳腺组织重建所必需。