高强度聚焦超声不完全消融对体外培养肝癌细胞的影响

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目的 通过高强度聚焦超声不完全消融筛选残留肝癌细胞亚系,探讨其生物学行为改变及其对血管形成的影响。方法在声功率5W下,HIFU消融肝癌细胞悬液,获得相应的温度-时间曲线,通过细胞活力检测实验筛选出最佳温度下的不完全消融肝癌细胞亚系,继续培养获得稳定子代。细胞活力实验检测细胞增殖活力及热耐受性,肝癌细胞迁移和侵袭能力的变化通过划痕实验和Transwell小室侵袭实验鉴别;通过检测内皮细胞活力、迁移能力及管腔成形能力了解肝癌细胞亚系对内皮细胞的影响,并通过RT-PCR和Western-Blot检测肝癌细胞亚系VEGF mRNA和蛋白的表达量。结果随着HIFU消融时间增加,SMMC7721肝癌细胞悬液温度增加,细胞死亡率增加,在45℃-47℃之间,肝癌细胞死亡率逐渐增加,而残留的肝癌细胞能存活并继续增殖,在48℃及以上温度肝癌细胞在24h内全部死亡,从而得到生存界限温度阈值47℃,此温度下筛选出的SMMC7721肝癌细胞亚系增殖率、热耐受性较正常肝癌细胞增强(P<0.05),运动能力、侵袭能力无明显变化。而SMMC7721肝癌细胞亚系VEGF mRNA和蛋白表达量增加,并能促进内皮细胞增殖、迁移和管腔形成(P<0.05),发挥更强的血管形成促进作用。结论 高强度聚焦超声能够杀灭肿瘤细胞,然而高强度聚焦超声不完全消融残留的肝癌细胞生物学行为发生转变并能发挥更强的促进血管形成。
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