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目的:神经胶质瘤(gliomas)是成人最常见的原发性恶性脑肿瘤,具有较高的发病率和死亡率。近年来,随着科学技术的迅猛发展,神经胶质瘤的治疗水平和治疗效果已显著提高。然而,神经胶质瘤的整体预后仍然没有大的起色。因此,进一步研究神经胶质瘤发生、发展的机制意义重大。泛素化途径是细胞内蛋白质降解的一个重要途径,也是最重要的翻译后修饰手段,在各种生物学过程中,如细胞周期调控、增殖和凋亡等,起着重要的作用。以往的研究表明细胞泛素化过程与肿瘤的发生、发展密切相关。泛素连接酶E3C(UBE3C)是E3泛素连接酶HECT(Homology to E6AP C-Terminus)家族成员之一。研究发现其高表达可诱导肝癌细胞的上皮间质转化,从而促进肝癌的侵袭转移。但是,到目前为止,UBE3C在胶质瘤发生、发展过程中的作用尚未见相关研究报道。因此,本课题拟对泛素连接酶E3C在胶质瘤发生、发展中的作用进行研究。方法:收集胶质瘤组织标本及瘤旁脑组织标本,通过定量PCR、免疫组织化学检测UBE3C在胶质瘤组织及相应瘤旁组织中表达,并分析两者间的差异性。结合胶质瘤患者临床病理特征及预后资料,分析UBE3C表达与患者预后之间的关系。检测不同胶质瘤细胞系中UBE3C的表达,应用RNA干扰在高表达UBE3C胶质瘤细胞系中敲低UBE3C表达,应用c DNA转染在低表达UBE3C的胶质瘤细胞系中上调UBE3C的表达后,对UBE3C表达水平不同的胶质瘤细胞的侵袭与增殖情况进行检测。通过免疫共沉淀结合质谱分析筛选出UBE3C相互作用蛋白,进一步验证UBE3C与其相互作用蛋白的关系,通过调节UBE3C及与UBE3C相互作用蛋白的表达,检测两者之间在功能上的相互作用。应用泛素化特异性抑制剂等在胶质瘤细胞及工具细胞中研究UBE3C与其相互作用蛋白的关系,并在组织水平验证。结果:荧光定量PCR显示UBE3C在胶质瘤组织中较瘤旁脑组织中的m RNA表达上调,两者之间差异具有显著性(p<0.05)。免疫组织化学同样显示UBE3C蛋白水平在胶质瘤组织中的表达明显高于瘤旁脑组织(p<0.05)。UBE3C蛋白的高表达与胶质瘤患者的高分级、GFAP阳性、化疗敏感性等临床病理因素相关(p<0.05)。UBE3C高表达组的总生存率明显低于UBE3C低表达组;UBE3C高表达组的复发率明显高于UBE3C低表达组(p<0.01)。这些结果表明UBE3C高表达是胶质瘤复发的独立相关因素。通过应用RNA干扰技术沉默U87、U251、TJ861与TJ899胶质瘤细胞系中UBE3C的表达,以及应用c DNA转染技术增加SHG44胶质瘤细胞系中UBE3C的表达,结果发现UBE3C可促进胶质瘤细胞的侵袭与迁移,但是不影响胶质瘤细胞的增殖。在U87、U251、TJ861与TJ899胶质瘤细胞系中,应用免疫共沉淀结合质谱和生物信息学分析筛选出10个UBE3C相互作用蛋白。进一步通过实验分析证明ANXA7是UBE3C的作用底物。UBE3C可促进ANXA7蛋白泛素化降解和促进胶质瘤细胞的侵袭性。进一步对临床胶质瘤组织标本进行分析发现UBE3C和ANXA7的表达呈负相关关系。结论:UBE3C在胶质瘤中表达上调,高表达UBE3C与胶质瘤的不良预后相关;UBE3C通过诱导ANXA7降解促进胶质瘤的进展。